его работы в регенерирующей печени млекопитающих.// Биополимеры и клетка. - 1989. - Т. 5, № 2. - С. 79 - 88.
13. Прима В.И., Клочко Т.А., Оболенская М.Ю., Иванов П.И., Рысков А.П., Платонов О.М. Синхронные изменения концентраций c-fos РНК и В2мРНКх в пререпликативном периоде регенерации печени.// Биополимеры и клетка. - 1989. - Т. 5, № 6. - С. 83 -86.
14. Оболенская М.Ю., Прима В.И., Клочко Т.А., Патер Л.В., Шоколенко И.Н., Платонов О.М. Циклозависимая экспрессия гена, кодирующего В2мРНКх.// Молекулярная биология, вирусология и микробиология. - 1991.- № 6. - С. 31 - 33.
15. Obolenskaya M.Yu., Bernauer H., Tran - Thi T.-A., Decker K. Levels of RNA for TNF and TNF receptors during the prereplicative period of liver regeneration.// Биополимеры и клетка. - 1994. - Т.10, № 4. - С. 152 - 156.
16. Obolenskaya M.Yu., Vanin A.F., Mordvintcev P.I., Mulsch A., Decker K. EPR evidence of nitric oxide production by the regenerating rat liver.// Biochem. Biophys. Res. Comm. - 1994. - V. 202, № 1. - Р. 571 - 576.
17. Obolenskaya M., Schulze-Specking A., Plaumann B., Frenzer K., Freudenberg N. and K. Decker. Nitric oxide production by cells isolated from regenerating rat liver. // Biochem.Biophys. Res. Comm. - 1994. - V. 204, № 3. - Р. 1305 -1311.
18. Патер Л.В., Хрипунов В.А., Квитницкая А.Б., Прима В.И., Оболенская М.Ю., Платонов О. М. Экспрессия протооонкогенов c-myc и c-fos во время первого клеточного цикла в регенерирующей печени крыс.// Биополимеры и клетка. - 1994. - Т. 10, № 2. - С. 57 -60.
19. Decker K., Obolenskaya M. Cytokines, nitric oxide synthesis and liver regeneration.// J. Gastroenterology and Hepatology. - 1995. - № 10. - S12-S17.
20. Оболенская М.Ю., Ванин А.Ф., Мордвинцев П.И., Декер К. Окись азота в регенерирующей печени крыс. // Биополимеры и клетка. - 1995. - Т. 11, № 2. - С. 76 - 82.
21. Оболенская М.Ю., Кэльве М., Сазонова Л.Я. 2"5"олиго(А) синтетазная активность на ранних этапах регенерационного процесса в печени крыс. // Биополимеры и клетка. - 1997. - Т.13, № 5. - С. 391 - 396.
Статті в наукових збірниках
22. Оболенская М.Ю., Платонов О.М., Грабко В. Некоторые методические особенности макромолекулярной гибридизации РНК и ДНК.// Методы молекулярной биологии. - К.: Наукова Думка, 1979. - С. 45 - 55.
23. Оболенская М.Ю., Прима В.И., Куликовская И.А., Сохань Э.Н., Корнюшина Т.В., Платонов О.М. Гибридизация нуклеиновых кислот эукариотов в растворах формамида с высокой концентрацией.// Молекулярная биология. - К.: Наук. Думка, 1982. - Т. 31. - С. 27 - 32.
24.Оболенская М.Ю. Экспрессия генома в регенерирующей печени млекопитающих.// Современные проблемы регенерации. Фармаколо-гическая регуляция регенерации. - Йошкар-Ола. - 1987. - С. 139 -152.
Матеріали наукових конференцій і симпозіумів
25. Obolenskaya M., H. Bernauer, K. Decker. Do Kupffer cells take part in triggering of liver regeneration? // Proc. of the Sixth Intern. Symposium on Cells of the Hepatic Sinusoid. Antwerpen (Belgium) 1992. - Cells of the hepatic sinusoid (eds. D.L.Knook, E.Wisse). - AkLeiden, Netherlands, 1993. - V. 4. - P. 76 - 78
26. Obolenskaya M.Yu., Decker K. Liver regeneration: interplay between two systems of intercellular communication, cytokines and nitric oxide.// Proc. of the Seventh Intern. Symposium on Cells of the Hepatic Sinusoid. Kyоto (Japan) 1994.- Cells of the hepatic sinusoid (eds. D.L.Knook, E.Wisse, К.Wake). - AkLeiden, Netherlands, 1995. - V.5. - Р. 339 - 342.
27. Obolenskaya M., L. Pater, L. Sazonova, A. Elskaya and K. Decker. Kupffer Cells and Liver Regeneration.// Proc. of the Eighth Intern. Symposium on Cells of the Hepatic Sinusoid. Bordeaux (France) 1996. - Cells of the Hepatic Sinusoid (eds. E.Wisse, D.L.Knook, C.Balabaud).- AkLeiden, Netherlands, 1997. - V.6. - P. 340 - 343.
28. Obolenskaya M., H. Bernauer, K. Decker. Do Kupffer cells take part in triggering of liver regeneration?// Abstracts of the Sixth International Symposium on Cells of the hepatic sinusoid. - Antwerpen, Belgium, 23-30 August, 1992. - P. 134.
29. Obolenskaya M.Yu., Pater L.V., Decker K. Expression of transcriptional factors c-Fos, c-Myc and HNF-1 in the liver after partial hepatectomy and laparatomy.// Abstracts of the International Falk Workshop "Normal and malignant liver cell growth". - Halle (Germany). - 1998. - P. 24.
АНОТАЦІЇ
Оболенська М.Ю. Регенерація печінки у щурів: молекулярно-біологічні процеси, їх регуляція та часова шкала. - Рукопис.
Дисертація на здобуття наукового ступеня доктора біологічних наук за спеціальністю 03.00.03 - молекулярна біологія. - Інститут молекулярної біології і генетики НАН України, Київ, 1999.
Досліджено синтез ДНК, внутрішньоклітинний розподіл і кількість новоутвореної РНК, кінетичну складність ядерної РНК, експресію окремих генів (c-fos, c-myc, P4502E1, ЯФГ-1, фактору некрозу пухлин і його рецепторів), активність системи 2'5'-оліго(А)синтетази-РНКази L і синтез окису азоту в регенеруючій печінці щурів. Запропоновано часову шкалу процесу. Сформульовано положення про часткове обмеження експресії геному в перехідний період регенерації, про синергізм між проліферативною і клітинноспецифічною активністю клітин печінки різного типу і про взаємне обмеження клітиноспецифічної і проліферативної активності в клітинах печінки одного типу.
Ключові слова: регенерація печінки; непаренхімні клітини; фактор некрозу пухлин; 2'5'-оліго(А)синтетаза-РНКаза L; окис азоту; с-fos; c-myc; ЯФГ-1; Р4502Е1.
Obolenskaya M.Yu. Rat liver regeneration: мolecular processes, their regulation and the time scale. - Manuscript.
Thesis for a doctor's degree by speciality 03.00.03 - molecular biology. - The Institute of Molecular Biology and Genetics of National Academy of Sciences of Ukraine, Kyiv, 1999.
This thesis is focused on DNA synthesis, amount and intracellular distribution of newly formed RNA, kinetic complexity of nuclear RNA, gene expression (c-fos, c-myc, P4502E1, HNF-1, tumor necrosis factor and its rceptors), activity of 2'5'-oligo(A)synthetase-RNAse L system and nitric oxide production in regenerating rat liver. The time-scale of the process is proposed. The following statements are formulated: about the partial restriction of genome expression during the transition period, about synergism of proliferative and cell-specific activities between the cells of different type and about mutual restriction of proliferative and cell-specific activities in the cells of the same type.
Key words: liver regeneration; nonparenchymal cells; tumor necrosis factor; 2'5'-oligo(A)synthetase-RNAse L; nitric oxide; c-fos; c-myc; HNF-1; P4502E1.
Оболенская М.Ю. Регенерация печени у крыс: молекулярно-биологические процессы, их регуляция и временная шкала. - Рукопись. Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук по специальности 03.00.03-молекулярная биология. - Институт молекулярной биологии и генетики НАН Украины, Киев, 1999. Диссертация посвящена исследованию молекулярных механизмов, которые обеспечивают переход высокоспециализированных и неактивных в пролиферативном отношении клеток печени к пролиферации и координацию их клеточноспецифической и пролиферативой активности в регенерирующей печени крыс. Регенерацию печени крыс моделировали путем удаления 2/3 органа. Эта операция вызывает сложную ответную реакцию, которая включает в качестве составных элементов реакцию острой фазы со стороны печени, компенсаторные реакции поддержания приоритетных функций органа, собственно пролиферацию клеток и смену фенотипа “покоящихся” клеток на фенотип делящихся клеток. Реакция острой фазы со стороны печени, которая проявлятеся в ответ на повреждение организма любой этиологии и любой локализации и направлена на ограничение деструктивных и активацию репаративных процессов, моделировалась с помощью лапаротомии (ЛАП). Параллельное исследование одних и тех же показателей во время реакции острой фазы со стороны печени и в процессе регенерации дало возможность отнести некоторые из обнаруженных изменений к определенным патофизиологическим процессам. Основное внимание в диссертации было уделено исследованию экспрессии генома и отдельных генов, которые кодируют клеточноспецифические и неспецифические для паренхимных и непаренхимных клеток печени регуляторные факторы. Определены количество и внутриклеточное распределение новообразованной РНК, кинетическая сложность ядерной РНК, экспрессия клеточноспецифических (P4502E1, ЯФГ-1, фактор некроза опухолей) и неспецифических (c-fos, c-myc, рецепторы фактора некроза опухолей) белков, активность системы 2'5'-олиго(А)синтетазы - РНКазы L и синтез окиси азота в печени крыс после ЧГЕ и ЛАП. Для создания часовой шкалы регенерационного процесса исследовались показатели пролиферативной активности клеток печени. Установлено, что в регенерирующей печени крыс гепатоциты, клетки Купфера и эндотелиальные клетки синусоидов вступают в клеточный цикл в приведенной последовательности. Предложено использовать параметры клеточных циклов клеток печени разных типов в качестве временных ориентиров регенерационного процесса, а период между операцией и началом клеточного цикла гепатоцитов рассматривать как переходный от пролиферативно неактивного состояния ткани к пролиферативно активному. Предложено различать два этапа в течение переходного периода регенерационного процесса: этап начальной компенсаторной реакции (0-0,5 ч после ЧГЭ) и этам перепрограммирования деятельности клеток (0,5-3 ч после ЧГЭ). Первый характеризуется повышением синтеза тотальной РНК и ее фракций, ускорением перехода новообразованной РНК из ядра в цитоплазму, повышением экспрессии клеточноспецифических (ЯФГ-1, Р4502Е1) и клеточнонеспецифических (c-myc, c-fos) белков. Для второго этапа характерны снижение синтеза и поступления новообразованной РНК в цитоплазму, уменьшение разнообразия ядерной РНК и задержка ее в ядре. Впервые обнаружена активация системы 2"5"олиго(А)синтезаы - РНКазы L и ее специфического индуктора интерферона / в течение переходного периода регенерационного процесса. Предложена гипотеза, согласно которой активное избирательное удаление "старых" РНК, в частности, с помощью вышеуказанной системы, рассматривается как необходимый этап при переходе высокодифферецированной ткани от покоя к проли-ферации. Впервые в регенерирующей печени обнаружена экспрессия генов, кодирующих фактор некроза опухолей и его два рецептора, и определено значительное повышение их экспрессии в течение переходного периода регенерации. Обосновано положение о ведущей роли непаренхимных клеток печени в запуске регенерационного процесса, что обеспечивается активацией их клеточноспецифических функций в течение переходного периода и первого клеточного цикла гепатоцитов. Впервые охарактеризован синтез окиси азота в регенерирующей печени крыс. Количество NO, которое продуцируют гепатоциты, клетки Купфера и эндотелиальные клетки синусоидов, уменьшается в приведенном ряду клеток и коррелирует с фазами их клеточных циклов - повышено в G1- и G2- и снижено в S-фазе. Впервые на модели регенерирующей печени in vivo продемонстрирована взаимосвязь между экспрессией гена c-myc и фазами клеточного цикла гепатоцитов - повышение в течение G1- и G2- и снижение в S-фазе, и между экспрессией генов с-fos, ЯФГ-1 и Р4502Е1 и ответом печени на травму. На основании анализа полученных и имеющихся данных предложена концепция о синергизме клеточноспецифической активности одних клеток регенерирующей печени и пролиферативной активности других и о взаимоограничении этих активностей в клетках одного типа.
Ключевые слова: регенерация печени; непаренхимные клетки; фактор некроза опухолей; 2'5'-олиго(А)синтетаза-РНКаза L; окись азота; c-fos; c-myc; ЯФГ-1; P4502E1.
| 
