ВИСНОВКИ
1. Вивчені особливості біології видів орхідних Криму, що мають статус I категорії рідкості (Comperia comperana, Himantoglossum caprinum, Ophrys taurica).
2. Встановлено, що ритми розвитку, характерні для малого життєвого циклу орхідних, зберігаються при культивуванні в умовах in vitro у вигляді асимбіотичних протокормів та проростків. При цьому в межах великого життєвого циклу срок проходження ранніх етапів онтогенезу скорочується в 2,5-3 рази для бульбоносних (Ophrys taurica, O.oestrifera, Platanthera chlorantha) та 3-5 разів для кореневищних (Goodyera repens) видів орхідних у порівнянні з їхнім розвитком в природі.
3. Показано, що життєздатність вегетативних органів орхідних корелює з кількістю і відносною активністю ізоформ пероксидази, що визначає загальну стійкість рослин до несприятливих факторів зовнішнього середовища.
4. Вивчені морфогенетичні потенції органів та тканин бульбоносних (Anacamptis pyramidalis, Comperia comperana, Himantoglossum caprinum, Ophrys taurica, O.oestrifera, Platanthera chlorantha) та кореневищних (Goodyera repens) видів орхідних в умовах in vitro. Оптимальними експлантами для мікророзмноження є насіння із нерозкритих коробочок.
5. Виявлена залежність проростання насіння з нерозкритих коробочок від стадії їхнього визрівання у видів, що володіють глибоким спокоєм: 40-45 діб з моменту запилення для Anacamptis pyramidalis, Platanthera chlorantha; 45-50 діб для Ophrys oestrifera, O. taurica, Cоmperia comperana і 50-55 діб для Himantoglossum caprinum.
6. Підібрані склади живильних средовищ для розвитку протокормів (Knudson C c 0,1% гуматом калію) та проростків (ОII c 50,6-63,2 мкМ гліцину), які можуть використовуватися для масового мікророзмноження дикоростучих орхідних.
7. Визначені умови тривалого збереження (протягом трьох років) насіння, здатного до проростання в умовах in vitro, що є вкрай важливим для відтворення генофонду і розмноження рідкісних видів.
8. Розроблений спосіб мікророзмноження in vitro бульбоносних та кореневищних видів орхідних і визначений режим адаптації рослин. Використання способу має важливе значення для підтримання біологічної різноманітністі та збереження дикоростучих видів орхідних.
9. Обгрунтована необхідність додаткових засобів охорони трьох вузькоареальних, ендемічних видів орхідних флори Криму (Comperia comperana, Himantoglossum caprinum, Ophrys taurica) в формі організації заповідних територій в місцях зростання популяцій з найбільшою чісельністю осбин, а також шляхом масового розмноження в культурі з наступною репатріацією.
СПИСОК РОБІТ, ОПУБЛІКОВАНИХ ПО ТЕМІ ДИСЕРТАЦІЇ
1. Попкова Л.Л., Митрофанова О.В. Особенности морфогенеза некоторых орхидных Крыма при семенном размножении in vitro // Бюл. бот. сада им. И.С. Косенко Кубанского госагроуниверситета. - Краснодар, 1998, № 7. - С. 125-127.
2. Попкова Л.Л., Митрофанова О.В. Возможности длительного хранения всхожих семян дикорастущих орхидей в условиях in vitro // Бюл. бот. сада им. И.С. Косенко Кубанского госагроуниверситета. - Краснодар, 1998, № 7. - С. 128-129.
3. Попкова Л.Л. Особенности малого жизненного цикла некоторых орхидных в природе и в условиях in vitro // Бюл. Никит. ботан. сада. - 1997. - Вып. 78. - С. 66-72.
4. Попкова Л.Л., Митрофанова О.В. Морфогенез некотороых орхидных Крыма при семенном размножении в условиях in vitro // Биотехнологические исследования садовых и других ценных многолетних культур. Сб. науч. трудов / Никит. ботан. сад. - 1997. - Т. 119. - С. 168-181.
5. Попкова Л.Л. Фенология развития и возрастная структура популяций некоторых орхидных Крыма // Проблемы дендрологии, цветоводства, плодоводства: Междунар. конф. молодых ученых, г. Ялта, 6-10 октября 1997 г.: Материалы. - Ч. 2. - Ялта, 1997. - С. 97-101.
6. Попкова Л.Л. Общность и различия биоморфологии дикорастущих клубневых и корневищных орхидей в условиях in vitro // Проблемы дендрологии, цветоводства, плодоводства: Междунар. конф. молодых ученых, г. Ялта, 6-10 октября 1997 г.: Материалы. - Ч. 2. - Ялта, 1997. - С. 92-96.
7. Попкова Л.Л., Митрофанова О.В., Корженевский В.В. Сравнительное изучение процессов морфогенеза некоторых орхидных Крыма при семенном размножении in vitro // Проблемы дендрологии, цветоводства, плодоводства, виноградарства и виноделия: Междунар. конф. молодых ученых, г. Ялта, 14-16 октября 1996 г.: Материалы. - Т. 1.- Ялта, 1996.- С. 119-122.
8. Попкова Л.Л., Митрофанова О.В. Некоторые аспекты семенного размножения дикорастущих орхидей Крыма в условиях in vitro // Проблемы дендрологии, цветоводства, плодоводства, виноградарства и виноделия: Междунар. конф. молодых ученых, г. Ялта, 14-16 октября 1996 г.: Материалы. - Т. 1.- Ялта, 1996.- С. 116-118.
9. Попкова Л.Л. Изучение морфогенеза некоторых видов рода Ophrys L. при семенном размножении in vitro // Пути решения проблем и перспективы развития биотехнологии в декоративном саловодстве и плодоводстве: Междунар. конф., г. Ялта, 25-26 сентября 1997 г.: Тез. докл. - Ялта, 1997. - С. 21.
10. Попкова Л.Л., Митрофанова О.В. Особенности семенного размножения in vitro орхидей флоры Крыма // Проблемы дендрологии, садоводства и цветоводства: Междунар. конф. молодых ученых, г. Ялта, 25-27 сентября 1995 г. :Тез. докл. - Ялта, 1995. - С. 72.
Попкова Л. Л. Рідкісні види орхідних флори Криму, їх мікророзмноження та підтримання біологічної різноманітності. - Рукопис.
Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук з спеціальності 03.00. 05. - ботаніка. - Державний Нікітський ботанічний сад УААН, Ялта, 1999.
Дисертація присвячена вивченню рідкісних видів орхідних флори Криму та їх мікророзмноженню в умовах in vitro. Вперше проведено порівняльне вивчення морфогенетичних потенцій органів і тканин видів орхідних (Comperia comperana, Himantoglossum caprinum, Ophrys taurica), що мають статус І категорії рідкості. Встановлені оптимальні терміни відбору первинних експлантів (насіння з нерозкритих коробочок) і найкращі для розвитку протокормів та проростків живильні средовища. Виявлені умови тривалого збереження схожого насіння in vitro. Детально вивчені і зроблено опис етапів морфогенезу видів орхідних з різноманітними типами життєвих форм, ареалів і вегетації. Показано, що ритми розвитку, характерні для малого життєвого циклу орхідних, зберігаються при культивуванні in vitro асимбіотичних протокормів та проростків. В межах великого життєвого циклу скорочується термін формування протокормів та проростків 3-5 разiв у порівнянні з їхнім розвитком в природі. Розроблений спосіб мікророзмноження in vitro дикоростучих видів орхідних і визначений режим адаптації рослин.
Ключові слова: орхідні, життєва форма, протокорм, проросток, морфогенез, in vitro, мікророзмноження.
Попкова Л. Л. Редкие виды орхидных флоры Крыма, их микроразмножение и поддержание биологического разнообразия. - Рукопись.
Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.00.05. - ботаника. - Государственный Никитский ботанический сад УААН, Ялта, 1999.
Диссертация посвящена изучению редких видов орхидных Крыма и разработке метода их микроразмножения в условиях in vitro. В результате проведенных исследований изучены особенности биологии редких видов орхидных (Comperia comperana, Himantoglossum caprinum, Ophrys taurica, O. оestrifera). Отмечены различия в сроках вегетации у ювенильных, имматурных, вегетативных и генеративных растений. Установлены возрастные составы ценопопуляций и показатели плодообразования данных видов. Обоснована необходимость дополнительных мер охраны трех узкоареальных, эндемичных видов орхидных флоры Крыма (Comperia comperana, Himantoglossum caprinum, Ophrys taurica) в форме организации заповедных территорий в местах произрастания популяций с наибольшей численностью особей, а также путем массового размножения в культуре с последующей репатриацией. Впервые проведено сравнительное изучение морфогенетических потенций тканей и органов видов орхидных Comperia comperana, Himantoglossum caprinum, Ophrys taurica, имеющих статус I категории редкости. Определены оптимальные первичные экспланты для размножения in vitro (семена из нераскрывшихся коробочек). У видов, обладающих глубоким покоем семян, выявлена зависимость прорастания семян от стадии их созревания: 40-45 суток с момента опыления для Anacamptis pyramidalis, Platanthera chlorantha; 45-50 суток для Ophrys oestrifera, O.taurica, Cоmperia comperana и 50-55 суток для Himantoglossum caprinum. Определены условия длительного сохранения семян (в течение трех лет), способных к прорастанию in vitro, что является крайне важным для воссоздания генофонда и размножения редких видов. Показано, что жизнеспособность вегетативных органов орхидных и первичных эксплантов из них коррелирует с количеством и относительной активностью изоформ пероксидазы, определяя общую устойчивость растений к неблагоприятным факторам внешней среды. Прослеживались четкие отличия по изоферментным спектрам пероксидазы, с использованием галловой кислоты в качестве естственного субстрата, в листьях у двух близкородственных видов рода Ophrys L.. Эти данные можно использовать в качестве хемосистематического критерия при определении еще нецветущих особей, которые морфологически трудно различимы. Изучен морфогенез у клубневых (Ophrys taurica, O.oestrifera, Platanthera chlorantha) и корневищных (Goodyera repens) видов орхидных в природе и в условиях in vitro. Прослежены характерные особенности ранних этапов онтогенеза. Установлено, что ритмы развития, характерные для малого жизненного цикла орхидных, сохраняются при культивировании in vitro асимбиотических протокормов и проростков. При этом в пределах большого жизненного цикла срок прохождения ранних этапов онтогенеза сокращается в 2,5-3 раза для клубневых и в 3-5 раз для корневищных видов орхидных по сравнению с их развитием в природе. Подобраны составы питательных сред для развития протокормов (Knudson C c 0,1 % гуматом калия) и проростков (ОII c 50,6-63,2 мкМ глицина), которые могут использоваться для массового микроразмножения дикорастущих орхидных. Определены условия освещенности и температурного режима, необходимые для развития нормальных проростков орхидных. Показано, что гелиофитным видам (Ophrys taurica, O.oestrifera, Goodyera repens) при культивировании in vitro требуется интенсивность освещения 2-3 клк, в то время как теневыносливые виды (Platanthera chlorantha) лучше развиваются при освещенности до 1,5 клк. Подобран режим адаптации растений к условиям in vivo. Наиболее благоприятные сроки адаптации растений совпадали с началом вегетации растений в природе: осенью для Ophrys taurica, O.oestrifera и весной для Platanthera chlorantha. Лучшими субстратами являлись: смесь торф, перлит, мох (2:1:2), приближающаяся по составу к естественным, и природная почва с мхом из мест обитания, предварительно простерилизованная. Разработанный метод микроразмножения in vitro клубневых и корневищных видов орхидных дает возможность существенного сокращения ранних этапов онтогенеза и представляет большой интерес для поддержания биологического разнообразия и сохранения дикорастущих орхидных.
Ключевые слова: орхидные, жизненнная форма, протокорм, проросток, морфогенез, in vitro, микроразмножение.
Popkova L.L. Rare species of Crimean orchids, their micropropagation and conservation of biology difference.-Manuscript.
Thesis for degree of candidate of biological science on the speciality 03.00.05 - botany. - State Nikita botanical garden UAAS, Yalta, 1999.
The thesis is devoted to the study of the rare species of Crimean orchids and their micropropagation in condition in vitro. For the first time a comparative study of morphogenic potential of tissues and organs of orchids species Comperia comperana, Himantoglossum caprinum, Ophrys taurica, which have status of the first category of rarity, has been made. Optimal period taken primary explants (seeds from closed bull) and preferable cultural mediums for developed of protocorms and seedlings of orchids have been stated. Condition of long-time conservation in vitro germinate seeds of orchids have been revealed. Stages of morphogenesis were investigated and discribed in detail for ofchids species with different types of life forms, areals and vegetation. It was shown that seasonal rhythm characteric for annual life cycle in nature are keeped in conditions in vitro. In limited great life cycle times of development protocorms and seedlings are reduced in 3-5 to compare with development in nature. A method of wild orchids micropropagation in vitro has been worked out and conditions of plants adaptation were determined.
Key words: orchids, life form, protocorm, seedling, morphogenesis, in vitro, micropropagation.
________________________________________________________
Підписано до друку 02.02.99 р. Формат 60х90/16
Наклад 100 екз. Зам. № 3441
________________________________________________________
Друкарний цех Нікітського ботанічного саду
| 
