список опублікованих праць за темою дисертації
- Берест В.П., Гаташ С.В., Морозова Т.Ф. Термотропные изменения конформации фибриногена // Вісн. Харк. ун-ту.- 1998.- № 410. Біофізичний вісн. Вип.1.- С.71-74.
- Берест В.П., Гаташ С.В. Залежність агрегації тромбоцитів від температури // Фізіологічний журнал.-1998.-Т.44,№5-6.-С.89-94.
- Берест В.П., Морозова Т.Ф., Гаташ С.В. Спектрофотометрическое исследование влияния температуры на тромбоциты плазмы человека // Вісн. Харк. ун-ту.- 1998.- № 422. Біофізичний вісн. Вип.2.- С.45-48.
- Гаташ С.В., Берест В.П., Воробейчик М.В. Математическая модель динамики агрегации тромбоцитов. Определение зависимости кинетических параметров от температуры // Вісн. Харк. ун-ту.- 1999.- № 434. Біофізичний вісн. Вип.3.- С.71-77.
- Берест В.П., Гаташ С.В., Николов О.Т. Влияние температуры на диэлектрическую проницаемость суспензии тромбоцитов в 3-см диапазонне длин волн // Вісн. Харк. ун-ту.- 1999.- № 434. Біофізичний вісн. Вип.3.- С.92-95.
- Gatash S.V., Berest V.P. Temperature induced conformational transitions in fibrinogen // European Biophysics Journal.- 1997.- v.26, N1.- P.21.
- Berest V.P., Gatash S.V. The temperature dependence of fibrinogen molecule conformational state // P.Carmona, R.Navarro and A.Hernanz (eds.) Spectroscopy of Biological molecules: Modern Trends.-Dordrecht, London: Kluwer Acad.Publ.-1997.-P.37-38.
- Гаташ С.В., Николов О.Т., Берест В.П., Хакл О.В. Вивчення впливу температури на агрегацію тромбоцитів in vitro // Матеріали І З’їзду Українського біофізичного товариства.- Київ.- 1994- С. 61-62.
- Берест В.П., Гаташ С.В. Влияние температуры на индуцированную агрегацию тромбоцитов // Тезисы докладов Международной научной конференции “Идеи И.И.Мечникова и развитие современного естествознания”.-Харьков.-1995.-С.26-27.
- Берест В.П., Гаташ С.В., Дубовицкая О.В., Морозова Т.Ф. Исследование влияния температуры на состояние молекулы фибриногена // Там же.-С.27-28.
- Берест В.П., Гаташ С.В. Вплив фазового стану мембрани тромбоцита на температурну залежнiсть агрегацiї // Тези доп. VII Українського бiохiмiчного з'їзду.- ч.1.- Київ.- 1997.- C.35-36.
- Берест В.П., Гаташ С.В., Алесина М.Ю., Карпенко Н.А. Изменения агрегации тромбоцитов крыс из зоны отчуждения ЧАЭС // 3 съезд по радиационным исследованиям.- т.1.- Пущино.- 1997.- C.388-389.
- Berest V.P., Alesina M.Yu., Gatash S.V., Karpenko N.A. Influence of chronic prolonged impact of radiation in the Chernobyl exclusion zone on the platelet function of rats // Proceedings 2nd International Conference Long-Term Health Consequences of the Chernobyl Disaster.-Kiev.-1998.-P.185.
- Берест В.П., Гаташ С.В. Вплив температури на незворотну агрегацію тромбоцитів // Тези доповідей ІІ З’їзду Українського біофізичного товариства (УБФТ-98).- Харків.- 1998- С. 167.
- Berest V.P., Gatash S.V. Conformational dynamic of fibrinogen by dielectric spectroscopy // 5th Int. Conf. “Dielectric and Related Phenomena”(DRP’98).-Szczyrk.-1998.-P.103-104.
Анотація
Берест В.П. Вплив температури на агрегацію тромбоцитів у нормі і при дії гамма-опромінення. – Рукопис.
Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата фізико-математичних наук за спеціальністю 03.00.02 – біофізика. – Харківський державний університет, м. Харків, 1999.
Методами НВЧ-діелектрометрії, УФ-спектроскопії та світлорозсіювання досліджено вплив температури в області 4-44°С на структуру та функції тромбоцитів і фібриногену людини. Знайдено конформаційний перехід фібриногену при 18-22°С, який пов’язується зі зміною структури Д-домену. У суспензії тромбоцитів встановлені зміни стану води при 18-22 і 32-36°С і структурні зміни мембранних білків при 18-20 і 30-32°С. Отримані залежності ступеня і швидкості агрегації тромбоцитів від температури для різних індукторів і показано їх екстремальний характер. Запропоновано математичну модель агрегації тромбоцитів. Розраховано теоретичні криві агрегації, оптимізовані значення констант швидкостей за експериментальними даними для різних температур і визначені значення енергії активації. Показано, що характер залежності агрегації тромбоцитів від температури визначається фазовим переходом ліпідів мембрани і конформаційними змінами мембранних рецепторів і фібриногену при 18-22°С. Досліджено вплив γ-опромінення тромбоцитів in vitro (10-250 Гр) і хронічного комбінованого зовнішнього і внутрішнього in vivo (0,16-50 сГр) на залежність агрегації від температури. Показана різна радіовразливість білків плазми і мембранних компонентів
Ключові слова: тромбоцити, агрегація, фібриноген, температура, конформаційні переходи, НВЧ-діелектрометрія, УФ-спектроскопія, світлорозсіювання, математичні моделі, кінетика, гамма-опромінення
Аннотация
Берест В.П. Влияние температуры на агрегацию тромбоцитов в норме и при действии гамма-излучения. – Рукопись.
Диссертация на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук по специальности 03.00.02 – биофизика. – Харьковский государственный университет, г.Харьков, 1999.
Методами СВЧ-диэлектрометрии, УФ-спектроскопии и светорассеяния исследовано влияние температуры в области 4-44°С на структуру и функции тромбоцитов и фибриногена человека. Обнаружен конформационный переход фибриногена при 18-22°С, связываемый с изменением структуры Д-домена. В суспензии тромбоцитов установлены изменения состояния воды при 18-22 и 32-36°С и структурные изменения мембранных белков при 18-20°С и 30-32°С . Получены зависимости степени и скорости агрегации тромбоцитов от температуры для различных индукторов и показан их экстремальный характер. Предложена математическая модель агрегации тромбоцитов. Рассчитаны теоретические кривые агрегации, оптимизированы значения констант скоростей по экспериментальным данным для различных температур и определены значения энергии активации. Показано, что характер зависимости агрегации тромбоцитов от температуры определяется фазовым переходом липидов мембраны и конформационными изменениями мембранных рецепторов и фибриногена при 18-22°С. Исследовано влияние γ-облучения тромбоцитов in vitro (10-250 Гр) и хронического комбинированного внешнего и внутреннего in vivo (0,16-50 сГр) на зависимость агрегации от температуры. Показана различная радиочувствительность белков плазмы и мембранных компонент.
Ключевые слова: тромбоциты, агрегация, фибриноген, температура,, конформационные переходы, СВЧ-диэлектрометрия, УФ-спектроскопия, светорассеяние, математические модели, кинетика, гамма-облучение
SUMMARY
Berest V.P. Influence of temperature on platelet aggregation under normal conditions and under action of γ-irradiation. – Manuscript.
Thesis for candidate’s degree by speciality 03.00.02 – biophysics. – Kharkov State University, Kharkov, 1999.
The experimental and theoretical investigation of temperature influence on the platelet and fibrinogen structures under the action of γ-irradiation with doses 10-250 Gy has been performed for the range of 4-44°C.
The information concerning the structural changes of fibrinogen molecule at temperatures from 4 to 44°C has been obtained by means of the very high frequency dielectric spectroscopy and UV-spectroscopy methods. А new conformational transition has been observed in fibrinogen at 18-22°C. This transition might be connected to structural transition in D-domain of fibrinogen and accompanied by an increase in tryptophanyl accessibility to the solvent. The conformational transition revealed probably determines the character of the temperature dependence of blood platelet aggregation.
The structural changes of platelet membrane receptors have been registered as changes of intensities of derivative maxima in the UV-range at the temperatures of 18-20°C and 30-32°C.
The data on water structure change has been obtained by using very high frequency dielectric spectroscopy for the platelet suspension at 18-22°C and 32-36°C. The values of activation enthalpy for the process of dielectric relaxation of bulk waters in cell suspension have been calculated.
The influence of the temperature on platelet aggregation induced by various agents has been studied by using the light scattering method. It has been shown that the temperature dependences of degree and rate of platelet aggregation have maxima. The extreme nature of the temperature dependences does not depend on the platelet count, agonist concentration, and rate of suspension stirring.
The mechanism of the temperature dependence of platelet aggregation has been discussed. The existence of the membrane phase transition and change of receptor mobility allow one to explain the kink at the 20°C. The membrane proteins and fibrinogen conformational transitions take place at the same temperature. These lead to the decrease of aggregation.
The mathematical model of platelet aggregation kinetics has been suggested. The case of the total platelet activation has been considered. The aggregation is modeled as the process of elastic collisions platelets and spherical aggregates. The possibility of the disassociation of platelets from an aggregate due to the breakdown of molecular bridges and collisions between aggregates. The time variations of the numbers of platelets included into an aggregate for various temperatures have been obtained as the result of the numerical simulations. The optimization of the aggregation and disaggregation rate constants has been performed using experimental data obtained with the help of light scattering method. The temperature dependences of kinetic constants have been obtained, the corresponding values of activation energies have been calculated.
The temperature dependence of the aggregation platelet irradiated in vitro with doses 10-250 Gy has been studied by using light scattering method. The irradiation leads to the change of membrane viscosity and platelet protein conformation. The maximal values of aggregation have been registered for the doses 30-50 Gy. The change of the fibrinogen hydration has been registered at the same doses. The differences of the temperature dependences features of irradiated platelet aggregation induced by various agonists are connected to different radiosensitivity receptors of these agonists on the platelet membrane. It has been shown that the temperature dependence parameters of the aggregation rate and degree are sensitive to the irradiation.
Prolonged combined internal and external low-dose irradiation of whole body also leads to decrease of aggregation platelet. The change of platelet activity in the dependence on the storage terms is determined by the change of membrane viscosity, cytoskeleton protein structure, and plasma aggregation co-factors. However, these changes for the long duration storage reflect the haemopoesis disturbing and the emission of the platelets with changed lipid membrane composition into circulation.
Key words: platelet, aggregation, fibrinogen, temperature, conformational transitions, very high frequency dielectric spectroscopy, UV-spectroscopy, light scattering, mathematical models, kinetics, γ-irradiation.
Підписано до друку 25.08.1999 р. Формат 60х84 1/16.
Умовн. др. арк. 1,0 Тираж 100 прим. Замовлення № 2518
м. Харків, вул. Артема, 32, ТОВ “Знание”, (0572) 43-32-04
|