Коваленко Т.А. Цитогенетическаия и морфофункциональная характеристика ооцитов человека в связи с их оплодотворением іn vitro (клинико-экспериментальное исследование).
Рукопись диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.00.15 – генетика (биологические науки). Украинский научный гигиенический центр. Киев, 1999.
Метод оплодотворения in vitro (in vitro fertilization, IVF) широко внедряется в медицинскую практику большинства стран мира, как метод лечения многих форм бесплодия, не поддающихся лечению другими методами. Спектр его применения постоянно расширяется, включая самые тяжелые формы бесплодия, в частности мужского. Суть метода заключается в получении зрелых ооцитов человека после гормональной стимуляции суперовуляции, оплодотворении их вне организма и переносе полученных эмбрионов в матку женщины, где происходит их имплантация и дальнейшее развитие.
Его применение в Украине особенно актуально, поскольку демографическая и эпидемиологическая ситуация в последние годы характеризуется депопуляцией и высоким уровнем бесплодия (около 20% супружеских пар). Использование новых репродуткивных технологий и метода IVF в частности позволяет решать значительное количество проблем, связанных как с женским, так и с мужским бесплодием. Именно новые репродуктивные технологии могут стать одним из действенных средств сохранения генофонда Украины в условиях экологического кризиса, усиленного Чернобыльской катастрофой.
В настоящее время в Украине созданo 7 лабораторий, которые используют метод IVF для лечения разных форм бесплодия. Несмотря на то, что отечественными учеными и клиницистами учитывается опыт ведущих лабораторий мира, эффективность метода до сих пор остается достаточно низкой. Предполагается, что неудачи лечения бесплодия методом IVF обусловлены определенными морфофункциональными характеристиками ооцитов и хромосомными аномалиями, которые возникают во время гаметогенеза, оплодотворения и раннего эмбрионального развития. Кроме того, ряд биологических и клинических факторов, в первую очередь таких как, возраст женщины, показания к IVF и горманальная стимуляция суперовуляции могут негативно влиять на количественные, морфофункциональные и цитогенетические характеристики полученных ооцитов, и, таким образом, на эффективность оплодотворения in vitro.
Целью работы было исследование морфофункциональных и цитогенетических характеристик ооцитов человека и влияния на них некоторых клинических и биологических факторов (возраста женщины, гормональной стимуляции и показаний к IVF).
Было исследовано 492 неоплодотворившихся ооцита, полученных от 214 женщин, проходивших курс лечения бесплодия методом IVF в клиниках г. Киева. Для того, чтобы определить, можно ли экстраполировать закономерности, установленные при исследовании неоплодотворившихся ооцитов, на всю совокупность яйцеклеток, полученных в ходе IVF программ, было проведено дополнительное исследование на 988 ооцитах мышей линии СВА.
В результате проведенного исследования было установлено, что ооциты с нормальной морфологией в основном находятся на стадии МІІ мейоза и имеют большую вероятность оплодотворения как нормального, так и аномaльного. Хромосомный анализ ооцитов человека, которые остались неоплодотворенными после IVF и находились на стадии МІІ мейоза, показал, что 53,0% из них несли хромосомные аномалии. Кроме того, было установлено, что ухудшение количественных и морфологических характеристик полученных ооцитов приводит к снижению уровня их оплодотворения. Увеличение возраста женщины негативно влияет на морфофункциональные и цитогенетические характеристики ооцитов, полученных при проведении IVF программ. У пациентов с разными формами бесплодия полученные ооциты значительно отличаются по своим морфофункциональным показателям и по способности к оплодотворению. Результаты исследования влияния возраста и схем гормональной стимуляции суперовуляции на характеристики ооцитов мышей линии СВА совпадают с аналогичными данными о неоплодотворившихся ооцитах человека.
По теме диссертации было опубликовано 9 научных работ.
Ключевые слова: неоплодотворившиеся ооциты, цитогенетические характеристики, морфологические характеристики ооцитов, гормональная стимуляция, метафаза ІІ мейоза, возраст женщины, оплодотворение in vitro.
Kovalenko T.A. Cytogenetical and morphological oocytes charaсteristics associated with in vitro fertilization (сliniсs and eхperimental investigation).
The manuscript of dissertation for a Candidate’s degree in Biology, Speciality 03.00.15–genetics (biological science). Ukrainian Scientific Centre of Hygiene. Kуіv, 1999.
Correlation between oocytes with normal morphology and Metaphase II stage, level of fertilization (bofh normal and abnormal) was estimated. The level of chromosome anomalies in oocytes of second meiotic metaphase comprised 53,0%. The decreasing of number and aggravation of morphological oocyte parameters corelates with decreasing of their fertilization rate. Decreasing of woman age influences on morphological and cytogenetics oocyte parameters in negative way. In groups of patients with different causes of infertility recovering oocytes distinguish by their morphological, functional parameters and fertilization potential. Results of age and different schemes of gormonal stimulation influence on unfertilized human oocyte parameters and oocytes from CBA mice where compared.
9 scientific papers within the context of dissertation had been published.
Key words: unfertilized oocytes, cytogenetical parametres, morphological oocytes characteristics, meiotic II metaphase, hormonal stimulation, women’s age, in vitro fertilization.
|