АНОТАЦІЇ
Бизов В.В. Одержання екстракту з кріоконсервованих фрагментів ксеноселезінки та його застосування при абсцесах легенів. – Рукопис.
Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата медичних наук за фахом 14.01.35 – кріомедицина.- Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України, Харків, 2002.
У роботі був досліджений вплив умов кріоконсервування на збереження фрагментів селезінки свині після відігрівання і на склад одержуваного з них екстракту. Отримано екстракт із кріоконсервованих фрагментів ксеноселезінки з високим вмістом низькомолекулярних БАР. Вивчено молекулярно-масовий розподіл фракцій отриманого екстракту і його деякі біофармацевтичні властивості.
Розроблено методику ендобронхіального введення екстракту кріоконсервованих фрагментів ксеноселезінки, вивчена його клінічна ефективність при зазначеному шляху введення в комплексній терапії хворих з абсцесами легенів, а також досліджені деякі механізми дії екстракту при його місцевому застосуванні.
Ключові слова: кріопротектор, екстракт кріоконсервованих фрагментів ксеноселезінки, біофармацевтичні властивості, абсцес легенів, імунітет.
Бызов В.В. Получение экстракта из криоконсервированных фрагментов ксеноселезёнки и его применение при абсцессах лёгких. – Рукопись.
Диссертация на соискание учёной степени кандидата медицинских наук по специальности 14.01.35 – криомедицина. – Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, Харьков, 2002.
В работе исследовано влияние условий криоконсервирования на некоторые показатели сохранности фрагментов селезёнки свиньи после отогрева и состав получаемого из них экстракта.
При изучении интенсивности эндогенного дыхания, процессов перекисного окисления липидов, а также окрашивания трипановым синим, было установлено, что максимальной сохранностью обладают фрагменты селезёнки, криоконсервированные в присутствии 20% ПЭО-1500 при медленных скоростях замораживания (1°С/мин).
При изучении динамики выхода в экстракт белков, полипетидов и нуклеотидов из фрагментов селезёнки, криоконсервированных при различных условиях в сравнении с нативными фрагментами селезёнки, получены данные, свидетельствующие о том, что минимальный выход белка в раствор наблюдается при инкубировании фрагментов не подвергавшихся замораживанию и криоконсервированных в присутствии 20% ПЭО – 1500. Максимальный выход белка в раствор наблюдается при экстрагировании из фрагментов, криоконсервированных в присутствии 10% ДМСО. Максимальный выход полипептидов и нуклеотидов наблюдается при экстрагировании из фрагментов, криоконсервированных под защитой 20% ПЭО – 1500.
Таким образом установлено, что цикл замораживание-отогрев фрагментов селезёнки приводит к большему выходу в раствор полипептидов и нуклеотидов, чем при экстрагировании из нативных фрагментов селезёнки. Зависимость концентрации полипептидов и нуклеотидов от условий консервирования, а именно - меньшая их концентрация при неблагоприятных условиях консервирования фрагментов ткани (в присутствии ДМСО) может быть связана с тем, что в этом случае наблюдается активация перекисных процессов окисления, а это приводит к повреждению молекул полипептидов и нуклеотидов, а также их химическому взаимодействию с молекулами белка и, следовательно, удалению их из раствора как индивидуальных веществ, обладающих соответствующей структурой и функцией.
Предполагая, что экстракт, содержащий большее количество полипептидов и нуклеотидов будет обладать большей биологической активностью, чем экстракт, содержащий большее количество белка, был сделан вывод, что оптимальным материалом для получения экстракта, являются фрагменты селезёнки свиньи, криоконсервированные в присутствии 20% ПЭО-1500 при медленных скоростях замораживания.
В дальнейшем, объектом исследования являлся экстракт, полученный из криоконсервированных в присутствии 20% ПЭО-1500 при скорости охлаждения 1°С/мин. Экстракт получали инкубируя размороженные фрагменты селезёнки в физиологическом растворе в течение 60 мин.
С помощью метода высокоэффективной гельпроникающей хроматографии было определено молекулярно-массовое распределение фракций экстракта. Установлено, что основными фракциями экстракта являются: фракция свободных аминокислот (53,2%), фракция коротких пептидов с молекулярной массой 1000-3000 (26,1%), фракция белков (по молекулярной массе сравнимых с бычьим сывороточным альбумином) (18,4%), а также нуклеиновые кислоты с молекулярной массой более 120000 (2,3%). Методами спиновых и флуоресцентных зондов было установлено, что БАВ экстракта эффективно связываются с мембранами липосом и эритроцитов, а это является необходимым условием проявления их биологической активности.
Изучена клиническая эффективность эндобронхиального введения экстракта криоконсервированных фрагментов ксеноселезёнки в комплексной терапии 58 больных с абсцессами лёгких в сравнении с контрольной группой, состоящей из 64 больных, которым эндобронхиально вводились антибактериальные препараты. Отмечено, что применение ЭКФКС в комплексном лечении больных с гнойными абсцессами лёгких приводит к достоверному улучшению клинического течения заболевания, уменьшению количества случаев перехода процесса в хроническую форму и, следовательно, потребности в обширных оперативних вмешательствах. Средняя длительность пребывания больных на койке в этой группе сократилась на 7,2 дня. Применение эндобронхиального введения ЭКФКС у больных с гангренозными абсцессами легких не вызывало достоверного положительного клинического эффекта. На основании изучения исходного состояния и в процессе клинического наблюдения факторов местного и общего иммунитета установлено, что под воздействием экстракта восстанавливается функциональная активность фагоцитирующих клеток, способность к секреции лизоцима, повышается выработка секреторного IgA и альфа-интерферонов, восстанавливаются или имеют более чёткую тенденцию к восстановлению иммунные показатели периферической крови.
Таким образом, предложен метод получения экстракта из криоконсервированных фрагментов ксеноселезёнки, изучено молекулярно-массовое распределение фракций полученного экстракта, его некоторые биофармацевтические свойства. Изучены возможные механизмы действия экстракта криоконсервированных фрагментов ксеноселезёнки, а также его клиническая эффективность при эндобронхиальном введении в комплексной терапии больных с абсцессами лёгких.
Ключевые слова: криопротектор, экстракт криоконсервированных фрагментов ксеноселезёнки, биофармацевтические свойства, абсцесс лёгкого, иммунитет.
Byzov V.V. Obtaining of the extract from cryopreserved xenospleen fragments and its application at lung abscesses.- Manuscript.
Thesis on the obtaining the scientific degree of candidate of medical sciences (PhD equivalent) on the specialty 14.01.35, cryomedicine, Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the National Academy of Sciences of the Ukraine, Kharkov, 2002.
The effect of cropreservation conditions on the integrity of pig spleen fragments after warming, as well as on the composition of the obtained from them extract have been investigated in the work. Extract from cryopreserved spleen fragments with a high content of low molecular biologically active substances has been obtained. Molecular-mass distribution of the fractions of obtained extract and its some biopharmaceutical properties were studied.
The method for endobronchial introduction of the extract of cryopresrved spleen fragments has been elaborated, its clinical efficiency at the mentioned way of introduction in a complex therapy of the patients with lung abscesses, as well as some mechanisms of the extract effect during its local introduction were studied.
Key words: cryoprotectant, extract of cryopreserved xenospleen fragments, biopharmaceutical properties, lung abscess, immunity.
Відповідальний за випуск Г.О. Бабійчук
Підписано до друку 09.04.2002 р. Формат 60 х 90 1/16
Тираж 100 прим. Авт. арк. 0,9
Надруковано в ТОВ “Рейтинг”, вул. Сумська, 37,
тел. 47-01-23, 14-34-26.
| 
