АНОТАЦІЯ
Костюченко Л.В. Зміни морфофункціональних та імунологічних властивостей клітин і біохімічного складу плазми крові під впливом озонування. — Рукопис.
Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата медичних наук за спеціальністю 14.01.31 — гематологія та трансфузіологія. — Інститут гематології та трансфузіології АМН України, Київ, 2002.
Досліджено вплив різних режимів озонування крові в умовах in vitro на морфофункціональні властивості клітин, основні показники імунітету, біохімічні константи плазми, кислотно-основний стан та систему гемостазу. Встановлено, що обробка крові киснево-озоновою сумішшю зумовлює окисну деструкцію клітин крові, в найбільшій мірі еритроцитів. З'ясовано, що ступінь гемолізу знаходиться в лінійній залежності від застосованих доз/концентрацій озону. Показано, що озонування крові веде до змін імунологічних параметрів: активує фагоцитарну активність та окисні процеси в нейтрофілах, веде до зниження вмісту компонентів С3 і С4 системи комплементу; стимулює лейкоцити до продукції IL-1b. Високі концентрації озону (50, 60 мкг/мл) приводять до деструкції лейкоцитів і лімфоцитів. Вияснено характер і ступінь змін кислотно-основного стану крові при різних режимах озонування. Встановлено, що внаслідок гемолізу в плазмі збільшується рівень внутрішньоклітинних ферментів, калію, заліза і прямого білірубіну. Показано дозозалежні розлади системи гемостазу, пов'язані із зменшенням кількості та пригніченням агрегації тромбоцитів. На основі комплексної оцінки результатів встановлено безпечні концентрації озону для досліджених режимів озонування крові і запропоновано контролювати рівень гемолізу, кількість тромбоцитів та агрегаційну їх функцію у хворих, яким проводиться озонотерапія.
Ключові слова: озон, озонотерапія, кров, гемоліз, імунітет.
Аннотация
Костюченко Л.В. Изменения морфофункциональных, иммунологических свойств клеток и биохимического состава плазмы крови под влиянеим озонирования.
Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук по специальности 14.01.31 — гематология и трансфузиология. — Институт гематологии и трансфузиологии АМН Украины, Киев, 2002.
Изучается влияние разных режимов озонирования крови в условиях in vitro на морфофункциональные свойства клеток, основные показатели иммунитета, биохимические константы плазмы, кислотно-основное состояние и систему гемостаза. Исследования проводились на цельной донорской крови до и после ее озонирования при помощи аппарата для озонотерапии АТО-1 ("Kriometrum", Польша). Применялись два способа обработки крови, известные в литературе как большая и малая озонотерапия. Большая озонотерапия проводилась при концентрациях озона 40, 50, 60 и 75 мкг/мл в соотношении крови и кислородно-озоновой смеси (КОС) 1:4, а малая — при концентрациях 1, 10, 40 и 75 мкг/мл, соотношениях крови и КОС 1:4 и 1:1.
Установлено, что обработка крови озоном приводит к окислительной деструкции клеток крови, в наибольшей степени эритроцитов. Проведена сравнительная оценка использованных методов озонирования и доз/концентраций озона по степени их гемолизирующего воздействия на эритроциты. Показано, что наиболее агрессивной по отношению к эритроцитам является большая озонотерапия, при которой гемолизирующее действие озона усиливается негативным влиянием изменений давления в системе для озонирования. При всех использованных концентрациях озона в обработанной этим методом крови понижается количество эритроцитов, резко возрастает процент гемолиза и уровень свободного гемоглобина (Hb). При малой озонотерапия в соотношении крови и КОС 1:4 гемолизирующее влияние озона менее выражено, однако достоверно даже при минимальной концентрации озона 1 мкг/мл. При изменении соотношения между кровью и КОС до 1:1 при малой озонотерапии показатели гемолиза возрастают еще менее существенно. Установлено, что при всех изучаемых методах озонирования нарастание процента гемолиза и свободного Hb находится в линейной зависимости от концентраций озона. Отмечено влияние озона на функциональные свойства эритроцитов: тенденция до замедления их электрофоретической подвижности, снижения содержания АТФ и 2,3-ДФГ при озонировании свежей крови и увеличение их исходно низких уровней в концентрированной крови.
Озон в концентрации 10 мкг/мл (40 мкг на 1 мл крови) существенно не влияет на количество лейкоцитов и лимфоцитов крови, а также на иммунофенотипический профиль их популяций; активирует фагоцитарную функцию и окислительные процессы в нейтрофилах. Наблюдали также снижение содержания в плазме Ig A, M, G, при этом уровень Ig E существенно не изменялся. Достоверно понижается концентрация компонентов системы комплемента С3 и С4. Повышение концентрации озона (50 мкг/мл в КОС, 200 мкг на 1 мл крови и выше) вызывает окислительную деструкцию лейкоцитов и лимфоцитов.
В присутствии пирогенала озон in vitro стимулирует продукцию IL-1b, достоверный рост показателя наблюдали при концентрации озона 40 и 75 мкг/мл.
После обработки озоном в плазме крови вследствие гемолиза возрастает уровень внутриклеточных ферментов — лактатдегидрогеназы, ALT, AST, а также калия, железа, непрямого билирубина. Наблюдается снижение содержания щелочной фосфатазы, возможно, в связи с ее окислением озоном. При некоторых из примененных концентраций озона наблюдали снижение мочевины и креатинина. Уровень мочевой кислоты повышается и достоверен при концентрации 75 мкг/мл. Другие показатели белкового, жирового обменов, содержание элетролитов и глюкозы не изменяются.
Установлено, что озонирование достоверно изменяет газовый состав крови: уменьшает общее содержание СО2 и его растворимой фракции, почти в два раза увеличивается процент насыщения крови кислородом. рН озонированной крови на 0,01-0,09 выше исходных значений, очевидно, в связи с уменьшением в ней растворенного СО2. Содержание гидрокарбоната и оснований снижается. Однако окислительное воздействие озона остается в пределах компенсации буферными системами, поскольку не вызывает ацидоза. Зависимости изменений кислотно-щелочного состояния от концентрации озона в КОС не выявлено.
Озонирование крови приводит к изменениям показателей системы гемостаза, влияя в первую очередь на тромбоцитарное звено гемостаза за счет снижения числа тромбоцитов и дозозависимого угнетения их агрегации. Очевидно, в результате этого наблюдается удлинение времени рекальцификации плазмы и толерантности плазмы к гепарину. Изменений в коагуляционном звене гемостаза не выявлено.
На основании комплексной оценки результатов установлены безопасные концентрации озона для исследуемых режимов озонирования крови:
— для большой озонотерапии при соотношении крови и КОС 1:4 — до 5 мкг/мл;
— для малой озонотерапии при соотношении крови и КОС 1:4 — до 10 мкг/мл;
— для малой озонотерапии при соотношении крови и КОС 1:1 — до 95 мкг/мл.
Предложено контролировать параметры гемолиза и агрегационную функцию тромбоцитов у больных, получающих озонотерапию.
Ключевые слова: озон, озонотерапия, кровь, гемолиз, иммунитет.
SUMMARY
Kostiuchenko L.V. Morphofunctional and immunological features of cells and biochemical composition of plasma under the influence of ozonation. –Manuscript.
Thesis for acquisition of the scientific degree of Candidate of Medical Science majoring in Haematology and Transfusiology. – The Institute of Haematology and Transfusiology, AMS of Ukraine. Kyyiv, 2002.
The influences of different regiments of blood ozonation in vitro on morphofunctional features of cells, main immunological indexes, biochemical constants of plasma, blood gases balance and the system of homeostasis were investigated. It was found that processing the blood with oxygen/ozone gas mixture leads to oxygen destruction of blood cells, mostly – the red blood cells. It was discovered that grade of haemolysis is in linear dependency with doses/concentrations of the ozone used. It was shown that blood ozonation cause changes in immunological parameters: activates the phagocytic activity and oxidizing processes in neutrophils, leads to decrease in C3 and C4 components of complement system, stimulates white blood cells for IL-1b production. High concentrations of ozone (50, 60 mg/ml) result in white blood cells and lymphocytes destruction. Characteristics and degree of changes in blood gases balance under the different regiments of blood ozonation have been determined. Increased levels of plasma intracellular enzymes, potassium, iron, and direct bilirubin, as a result of haemolysis have been discovered. Dose-dependent disturbances in blood homeostasis due to decreased number of platelets and their depressed aggregation have been shown. Safe concentrations of ozone for investigated regiments of blood ozonation, based on complex evaluation of the results, have been determined. Suggested haemolysis parameters and platelets aggregation tests were recommended for control in patients receiving ozone therapy.
MeSH: ozone, ozone therapy, blood, haemolysis, immunity.
| 
