АННОТАЦИЯ
Орлова Н.В. "Влияние амфифильных соединений на осмотическую и температурную чувствительность эритроцитов”.- Рукопись.
Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.00.19. - криобиология и криомедицина. - Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, Харьков 2001.
В диссертации приведены теоретическое обобщение и новый подход к решению научной задачи коррекции осмотической и температурной чувствительности эритроцитов амфифильными соединениями, а также определена роль исходного состояния клеток в реализации антигемолитической активности амфифилов при гипертоническом стрессе эритроцитов.
В работе были использованы амфифильные соединения: представители катионных (хлорпромазин гидрохлорид), анионных (децилсульфат натрия, додецилсульфат натрия), неионных (додецил-β,D-мальтозид) и цвиттерионных (3децилдиметиламмоний-1-пропансульфонат натрия, 3-цетилдиметиламмоний-1-пропансульфонат натрия) классов поверхностно-активных веществ.
Представители различных классов амфифильных соединени, при использовании в микромолярных концентрациях существенно снижают уровень гипертонического гемолиза эритроцитов. Указанный эффект реализуется при одновременном действии на клетку гипертонической среды, как стрессового фактора, и амфифильного соединения. Величины антигемолитической активности зависят как от особенностей исследуемых веществ, так и от исходного состояния клеток, подвергающихся действию стрессовых факторов. В условиях гипертонического стресса эритроцитов при температуре 37 0С величины максимальной антигемолитической активности амфифильных соединений составляют 7090 %.
Исследуемые вещества способны дополнительно снижать уровень гемолиза эритроцитов, исходно проинкубированных в среде, содержащей 0,45 Моль/л NaCl, и перенесенных в литическую среду (4,0 Моль/л NaCl). При этом уровень гемолиза эритроцитов составляет 510 %. Эритроциты, проинкубированные в среде, содержащей 0,7 Моль/л NaCl, характеризуются метастабильным состоянием. Амфифильные соединения способны проявлять достаточно высокую антигемолитическую активность (5080 %) при перенесении таких метастабильных клеток в среду, содержащую 4,0 Моль/л NaCl (37 0С). Все исследуемые вещества проявляют высокую антигемолитическую активность (5070 %) и в условиях гипертонического стресса эритроцитов, модифицированных сульфгидрильным реагентом диамидом.
При варьировании условий проведения гипертонического стресса величины антигемолитической активности представителей различных классов амфифильных соединений изменяются однонаправленно. Так, изменение как температурных условий проведения гипертонического стресса (37 или 0 0С), так и условий исходной обработки клеток (инкубация в растворах 0,45 или 0,7 Моль/л NaCl, модификация диамидом), предшествующей гипертоническому лизису, приводят либо к увеличению антигемолитической активности всех веществ, либо к снижению этих величин тоже для всех исследуемых соединений.
Статистический анализ полученных данных показал, что зависимости уровня гипертонического гемолиза эритроцитов от концентрации амфифильного вещества при варьировании как осмотических и температурных условий среды исходной инкубации клеток, так и температурных условий литической среды подчиняются закономерностям одного типа для всех веществ.
Исследуемые амфифильные соединения однонаправленно влияют и на состояние эритроцитарной мембраны. В эффективных концентрациях они увеличивают микровязкость мембраны и не изменяют её барьерные свойства для катионов калия.
Полученные нами результаты позволяют предположить, что в условиях гипертонического стресса эритроцитов механизм антигемолитического действия является неспецифическим для представителей различных классов амфифильных соединений. Амфифильные соединения способны распределяться в эритроцитарную мембрану, о чём свидетельствует изменение формы клеток. Мы полагаем, что выявленная способность исследуемых соединений предотвращать гемолиз эритроцитов обусловлена изменением структурно-динамического состояния эритроцитарной мембраны при встраивании в неё амфифильных веществ.
В условиях постгипертонического криогемолиза эритроцитов катионный и анионные вещества проявляют антигемолитическую активность (4070 %), в то время как неионный и цвиттерионные соединения не обладают такой способностью. На основании полученных данных можно предположить, что механизм, лежащий в основе гемолиза эритроцитов при гипертоническом стрессе и постгипертоническом криогемолизе, различен.
Выявленное антигемолитическое действие амфифильных соединений в условиях осмотического и температурного стресса эритроцитов является основанием для разработки методических подходов по применению этих веществ с целью предупреждения повреждений клеток при действии экстремальных факторов.
Ключевые слова: гипертонический стресс, постгипертонический криогемолиз, эритроцит, эритроцитарная мембрана, предварительная модификация эритроцитов, амфифильные соединения, антигемолитическая активность, эффективная концентрация.
SUMMARY
Orlova N.V. “The effect of amphiphilic compounds on osmotic and temperature susceptibility of erythrocytes”.- Manuscript.
Thesis for obtaining the scientific degree of candidate of biological sciences (PhD equivalent) on the speciality 03.00.19 - cryobiology and cryomedicine.- Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the National Academy of Sciences of the Ukraine, Kharkov, 2001
Theoretical generalization and new approach for the solving of scientific task for the correction of osmotic and temperature erythrocytes susceptibility by amphiphilic compounds were presented, as well as the role of an initial cell state in the realization of amphiphiles antihemolytic activity under hypertonic stress of erythrocytes was determined.
Amphiphilic compounds: representatives of cationic (chlorpromazine hydrochloride), anionic (decylsulfate, dodecylsulfate), non-ionic (dodecyl-в,D-maltoside) and zwitterionic (3-decyldimethylammonium-1-propanesulfonate, 3-cetyldimethylammonium-1-propanesulfonate) classes of superficially active substances were used in the work.
The representatives of different classes of amphiphilic compounds, when using in micromolar concentrations significantly decreased the level of erythrocytes hypertonic hemolysis. This effect was realized under simultaneous effect of hypertonic medium on a cell both as a stress factor and amphiphilic compound. The values of antihemolytic activity depended both on the peculiarities of the studied substances and an initial cell state, subjected to stress.
Key words: hypertonic stress, posthypertonic cryohemolysis, erythrocyte, erythrocyte membrane, preliminary modification of erythrocytes, amphiphilic compounds, antihemolytic activity, efficient concentration.
Відповідальний за випуск Г.О.Бабійчук
Підписано до друку 27.11.2001. Формат 60х84 1/16.Обсяг 0,9 друкарських арк. Тираж 100 прим. Надруковано в
| 
