Библиотечный каталог авторефератов Украины

РОЗДІЛ 6. УЗАГАЛЬНЕННЯ РЕЗУЛЬТАТІВ ДОСЛІДЖЕННЯ

В даному розділі викладено узагальнення основних експериментальних результатів дослідження, які дозволяють зробити наступні висновки:

ВИСНОВКИ

1. ЛПС всіх досліджуваних штамів R.solanacearum за своєю структурою належать до S-форми – складаються із трьох компонентів: О-специфічного полісахариду, олігосахариду кору та ліпіду А.
2. Встановлено 7 типів структур О-ПС, 6 з яких описанi вперше. О-ПС досліджуваних штамів R.solanacearum складаються iз три- , тетра-  та пентасахаридних ланцюгiв, що повторюються. Характерними для О-ПС цього виду виявляються лiнiйнi тетра- чи розгалуженi пентасахаридні вуглеводні послідовності. Різниця між ними стосується розбiжностей у 

• типі конфігурації глiкозидного зв’язку залишку N-ацетилглюкозаміну;
• типi його зв’язку з сусіднiм залишком рамнози;
• наявності бічних замісників.

3. Більшість досліджуваних штамів R.solanacearum характеризується наявністю в складі ЛПС більше як одного типу структур О-ПС.
4. Не виявлено залежності між будовою О-ПС і належністю штаму до певного біовару, рослини-хазяїна, з якої було виділено штам, чи географiчної зони, з якої  він походить.
5. Особливості структури О-ПС впливають на прояв серологічної активності ЛПС. При цьому суттєва роль належить “варіабельній” області ланцюга, що повторюється, яка складається із залишку N-ацетилглюкозаміну і двох сусідніх з ним залишків рамнози. При змінах в  хімічній будові цієї зони активуються чи екрануються антигенні детермінанти молекули ЛПС. Значну роль у прояві серологічної активності молекулою ЛПС відіграє також ліпід А.
6. Якiсний моносахаридний склад кор-ОГ ЛПС дослiджуваних штамiв виявляється загалом типовим  для такого бiльшостi грамнегативних бактерiй, однак за кiлькiсним вмiстом окремих компонентiв рiзнi штами значно вiдрiзняються мiж собою.
7. Ліпіди А всіх досліджуваних штамів R.solanacearum характеризуються однотипною картиною якісного складу. Як домінуючi компоненти ліпіду А цього виду виявлено С14:0 (тетрадеканова), С16:0 (гексадеканова) , 3-ОН С14:0 (3-гідрокситетрадеканова), 3-ОН С16:0 (3-гідроксигексадеканова) та 3-ОН С18:0 (3-гідроксиоктадеканова) кислоти. Наявнiсть останньої є специфiчною ознакою представникiв виду R.solanacearum.
8. Встановлено, що ЛПС R. solanacearum  являється iндуктором утворення γ-iнтерферону. Вiдповiдальними за iнтерфероногенну активнiсть ЛПС є лiпiд А та кор-ОГ.
9. ЛПС R. solanacearum проявляє антилейкозну активнiсть, подовжуючи тривалiсть життя експериментальних тварин, а також виражену антиметастатичну дiю, зменшуючи об’єм та кiлькiсть метастазiв.

СПИСОК РОБIТ, ОПУБЛIКОВАНИХ ЗА ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦIЇ

1. Варбанец Л.Д., Н.А.Кочарова, Ю.А.Книрель,В.А.Мурас, Н.В.Москаленко, О.С. Броварская Липополисахариды Pseudomonas solanacearum и Pseudomonas cichorii. // Микробиол. журн. - 1990.- 52, №4. - с. 27-33.
2. Варбанец Л.Д., Рыбалко С.Л., Дядюн С.Т., Броварская О.С., Москаленко Н.В. Гликополимеры Clavibacter michiganense и Pseudomonas solanacearum - индукторы интерферона. // Микробиол. журн. - 1990. - 52, № 4. - с. 71-74.
3. Kocharova N. A., Knirel Yu. A., Varbanets L.D., Moskalenko N.V., Brovarskaya O.S., Muras V.A., Young J.M.  Studies of O-specific polysaccharide chains of Pseudomonas solanacearum lipopolysaccharides consisting of structurally different repeating units. // Carbohydr. Res. - 1993. - 250. - P.277-285.
4. Шашков А.С., Кочарова Н.А., Книрель Ю.А., Варбанец Л.Д., Москаленко Н.В., Здохлий А.В. Антигенные полисахариды бактерий. *38. Структура О-антигенов Pseudomonas solanacearum ICMP 7942 и ICMP 78169. // Биоорг. химия. - 1993. - № 11.-с. 1089 - 1094.
5. Варбанец Л.Д., Москаленко Н.В., Захарова И.Я. Структура О-специфических полисахаридов Pseudomonas solanacearum, представителей I биовара. // Микробиол. журн., - 1994.- 56, № 1.-с.
6. Kocharova N. A., Shashkov A., Knirel Yu. A., Varbanets L.D., Moskalenko N.V  Structure  of the O-specific polysaccharide  of Pseudomonas solanacearum strain 8089. // Carbohydr.Res. - 1994. - 259. - P.153-157.
7. Варбанец Л.Д., Шмалько Ю.П., Придатко О.Е., Жукова Е.В., Москаленко Н.В. Биологическая активность липополисахарида Pseudomonas solanacearum //  Микробиол. журн.- 1995.- 57, № 2.- с. 80 - 85.
8. Варбанец Л.Д., Москаленко Н.В.. Кавун Э.М., Мурас В.А., Житкевич Н.В. Изучение антигенной активности липополисахаридов Burkholderia solanacearum // Биохимия. - 1996.- 61, №5 .- с. 835 - 841.
9. Варбанец Л.Д., Кочарова Н.А.,Книрель Ю.А., Москаленко Н.В. - Структура О-специфической полисахаридной цепи липополисахаридов Burkholderia (Pseudomonas) solanacearum ICMP 750, 8093, 8115, 7864, 7945 // Биохимия - 1996- 61, № 5. - с. 807 - 813.

Москаленко Н.В.  Структурно-функцiональнi дослiдження лiпополiсахаридiв Ralstonia  solanacearum. - Рукопис.

Дисертацiя на здобуття наукового ступеня кандидата бiологiчних наук за спецiальнiстю 03.00.07 - мiкробiологiя. - Iнститут мiкробiологiї i вiрусологiї iм. Д.К.Заболотного НАН Украiни, м. Київ, 1999.

В роботi проведено систематичне дослiдження лiпополiсахаридiв (ЛПС) Ralstonia  solanacearum. Видiлено i охарактеризовано за якiсним i кiлькiсним складом ЛПС i їх окремi структурнi компоненти (О-специфiчнi полiсахариди, олiгосахариди кору i лiпiди А) iз 17 штамiв R. solanacearum, представникiв рiзних бiоварiв, якi вiдрiзнялись також рослиною-хазяїном та географiчним походженням. Встановлено 7 типiв структур О-специфiчних полiсахаридiв дослiджуваних ЛПС, 6 з яких описанi вперше. Показано, що особливості структури О-специфiчних полiсахаридiв  впливають на прояв серологічної активності ЛПС: при змінах в  хімічній будові “варiабельної“  зони активуються чи екрануються антигенні детермінанти молекули ЛПС. Встановлено, що ЛПС R. solanacearum  iндукує утворення γ-iнтерферону, вiдповiдальними за iнтерфероногенну активнiсть ЛПС є лiпiд А та кор-ОГ. ЛПС R. solanacearum проявляє виражену антиметастатичну дiю.

Ключовi слова: Ralstonia  solanacearum, лiпополiсахарид, О-специфiчний полiсахарид, олiгосахарид кору, лiпiд А, iнтерфероногенна активнiсть, антиметастатична дiя..

Москаленко Н. В. Структурно-функциональные исследования липополисахаридов Ralstonia  solanacearum. - Рукопись.

Диссертация на соискание ученой ступени кандидата биологических наук по специальности 03.00.07 - микробиология. - Институт микробиологии и вирусологии им. Д.К.Заболотного НАН Украины, г. Киев, 1999.

В работе проведено систематическое исследование липополисахаридов (ЛПС) Ralstonia  solanacearum. Выделено и охарактеризовано по качественному и количественному составу ЛПС и их отдельные структурные компоненты (О-специфические  полисахариды, олигосахариды кора и липиды А) из 17 штаммов R. solanacearum, представителей  разных биоваров, которые отличались также растением-хозяином и географическим происхождением. Установлено 7 типов структур О-специфических полисахаридов (О-ПС) исследуемых ЛПС, 6 из которых описаны впервые. О-ПС 7 штаммов характеризовались линейной структурой с тетрасахаридными повторяющимися звеньями, состоящими из трех остатков L-рамнозы и одного остатка N-ацетилглюкозамина. Они различались между собой вариациями в типе конфигурации гликозиднй связи остатка N-ацетилглюкозамина : α - в структурах 1 и 4  или β - в структуре 2, а также позицией его прикрепления к остатку рамнозы : 1→2 в структуре 1  или 1→3 в структурах 2 и 4. Для большинства штаммов обнаружено наличие разветвленных пентасахаридних повторяющихся звеньев основу которых составляли линейные тетрасахариды структуры 1 или 2. Различие между ними состояло в типе бокового заместителя: ксилоза  (структуры 3 и 5) или рамноза (структура 6)  и месте его присоединения к основной цепи. Среди исследуемых штаммов значительно выделялся по структуре О-ПС шт. 8089: он состоял из линейных трисахаридных повторяющихся звеньев, включающих 2 остатка D-рамнозы и 1 остаток N-ацетилгалактозамина (структура 7). Для многих штаммов было определено наличие в составе О-ПС нескольких типов структур повторяющегося звена, причем иногда разница между ними была обусловлена лишь соотношением типов структур. По качественному составу О-ПС исследуемые штаммы можно разделить на три хемотипа: представители I содержали в составе О-ПС L-рамнозу и N-ацетилглюкозамин; II - кроме того еще и ксилозу;  III - D-рамнозу и N-ацетилгалактозамин. Корреляции между структурой О-ПС и принадлежностью штамма к определенному биовару  или растению-хозяину не обнаружено. Показано, что особенности структуры О-специфических полисахаридов влияют на проявление серологической активности ЛПС: при изменениях химической структуры “вариабельной“  зоны (состоящей из остатка N-ацетилглюкозамина и двух соседних с ним остатков L-рамнозы) активируются или экранируются антигенные детерминанты молекулы ЛПС. Установлено, что ЛПС R. solanacearum обладает иммуномодулирующей активностью: индуцирует образование γ-интерферона (ответственными за интерфероногенную активность ЛПС являются липид А и кор-ОГ), а также проявляет выраженное антиметастатическое действие.

Ключевые  слова: Ralstonia  solanacearum, липополисахарид, О-специфи-ческий полисахарид, олигосахарид кора, липид А, интерфероногенная активность, антиметастатическое действие.

Moskalenko N. V. Structure-function investigations of Ralstonia solanacearum lipopolysaccharids. - Manuscript.

Thesis for a degree of candidate of biological sciences in speciality 03.00.07. - Microbiology. Zabolotny Institute of Microbiology, National Academy of Sciences of Ukraine, Kyiv, 1999.

The dissertation is devoted to systematic investigations of Ralstonia solanacearum  lipopolysaccharides (LPS). LPS were isolated and characterized from 17 strains of R. solanacearum, representatives of various biovars which were differed by plant-host and geographical origin. The seven types of O-specific polysaccharides structures were determined, six of them were described for the first time. The peculiarities of O-specific polysaccharides structure was show to influence the LPS serological activity: the changes in chemical structure of “variable” zone leads either to activation or screening the antigenic determinants of LPS molecule.

R. solanacearum LPS was established to induce γ-interferon production. Lipid A and core-oligosaccharide were responsible for interferon activity of  LPS. R. solanacearum LPS showed an expressed antimetastatic action.

Key words: Ralstonia  solanacearum, lipopolysaccharide, O-specific polysaccharide, core oligosaccharide, lipid A, interferoninducing activity, antimetastatic action.