|
Введение б
Глава 1. Материалы и методы 14
1.1. Насекомые 14
1.2. Энтомопатогенные микроорганизмы и методы заражения насекомых. 15
1.3. Приборы и реактивы. 17
1.4. Исследование зараженных тканей насекомых. 18
1.5. Отбор гемолимфы и приготовление гомогенатов внутренних органов 19
1.6. Определение активности и спектра неспецифических эстераз, активности глутатион-Б-трансферазы. 20
1.7. Определение продукции активированных кислородных метаболитов 22
1.8. Определение активности супероксиддисмутазы и концентрации тиолсодержащих соединений. 24
1.9. Определение паттерн-распознаюших белков 24
1.9.1. Определение агглютинрующеи активности гемолимфы капустной совки. 24
1.9.2. Определение паттерн-распознаюших белков в гемолимфе большой вощиной моли. - 26
1.10. Определение белка 26
1.11. Статистическая обработка экспериментальных данных. 27
Глава 2. Генерация активированных кислородных метаболитов у насекомых и ее изменение при различных патогенезах. 28
2.1. Источники и основные свойства АКМ. 29
2.1.1. Строение и свойства АКМ. 29
2.1.3. Источники АКМ в организме 34
2.1.4. Фенолоксидазоактивирующая система 37
2.2. Методические подходы при изучении активированных кислородсодержащих метаболитов .48
2.2.1. Люминол-зависимая хемилкзминесценция 49
2.2.2. Метод восстановления нитросинего тетразолия (НСТ) 52
2.2.2.1. Влияние активаторов фагоцитоза на восстановление нитро-синего тетразолиевого в гемоцитах насекомых. 58
2.2.2.2. Влияние ингибиторов на восстановление НСТ в гемоцитах насекомых. 69
2.2.3. Метод спиновых ловушек. 78
2.3. Генерация активированных кислородных метаболитов при различных патогенезах. 87
2.3.1. Образование АКМ при микроспоридиозе насекомых..88
2.3.1.1. Влияние микроспоридиоза на фенолоксидазную активность гемолимфы. 92
2.3.1.2. Влияние микроспоридиоза на восстановление нитросинего тетразолия в гемоцитах личинок G. mellonella 97
2.3.1.3. Окисление СР-Н гемолимфой личинок G. Mellonella при микроспоридиозе 99
2.3.2. Изменение продукции АКМ насекомых при бактериозах. 104
2.3.2.1. Изменение продукции АКМ при инъекции бактерий в гемоцель насекомых. 105
2.3.2.2. Изменение продукции АКМ у личинок G. Mellonella в течение бактериоза 115
2.3.3. Изменение продукции АКМ насекомых при микозах.. 120
2.3.4. Заключение 125
Глава 3. Детоксицируюшие ферменты насекомых. 128
3.1.1. Микросомальные монооксигеназы. 130
3.1.2. Неспецифические эстеразы насекомых. 131
3.1.3. Глутатион-3-трансферазы. 134
3.1.4. Факторы, влияющие на активность детоксицирующих ферментов 136
3.2. Изменение активности детоксицирующих ферментов насекомых при патогенезе 138
3.2.1. Влияние микроспоридиоза на спектр и активность неспецифических эстераз 139
3.2.1.1. Изменение активности и спектра эстераз гемолимфы G. mellonella 139
3.2.1.2. Изменение активности и спектра эстераз жирового тела G. mellonella 143
3.2.1.3. Изменение активности и спектра эстераз среднего кишечника личинок G. mellonella 144
3.2.1.4. Типирование неспецифических эстераз 152
3.2.1.5. Влияние микроспоридиоза на активность глутатион-Б-трансфераз 155
3.3. Влияние микозов на спектр и активность неспецифических эстераз 161
3.3.1. Типирование неспецифических эстераз при микозах.178
3.3.2. Влияние микозов на спектр и активность глутатион-S- трансфераз и микросомальных монооксигеназ 183
3.3.4. Изменение чувствительности G.mellonella к инсектицидам при микозах. 186
3.5. Влияние кристаллообразуюших бактерий на спектр и активность неспецифических эстераз личинок большой вощиной моли. 189
3.5. Заключение 195
Глава 4. Антиоксидантная система насекомых. 197
4.1. Ферментативные антиоксиданти. 197
4.2. Неферментативные антиоксиданты. 204
4.3. Активность антиоксидантов в тканях личинок G. mellonella при различных заболеваниях. 207
4.3.1. Влияние микроспоридиоза на активность супероксиддисмутазы, 207
4.3.2. Изменение концентрации тиолсодержащих соединений в гемолимфе G. mellonella при микроспоридиозе 214
4.3.3. Уровень и активность антиоксидантов в кишечнике личинок G. mellonella при перроральном инфицировании бактериями Bacillus thuringiensis ssp.galleriae 218
4.4. Заключение. 225
Глава 5. Паттерн-распознающие белки насекомых. 226
5.1. Агглютинины капустной совки. 232
5.2. Паттерн-распознающие белки большой вощиной огневки. 240
Заключение 246
Выводы. 255
Список литературы 255
| 
