Электронная библиотека Веда
Цели библиотеки
Скачать бесплатно
Доставка литературы
Доставка диссертаций
Размещение литературы
Контактные данные
Я ищу:
Библиотечный каталог российских и украинских диссертаций

Вы находитесь:
Диссертационные работы России
Медицинские науки
Кардиология

Диссертационная работа:

Герман Вера Мирославовна. Механизм действия гепарина при экспериментальных иммунных нефритах : ил РГБ ОД 61:85-3/1623

смотреть содержание
смотреть введение
Содержание к работе:

ВВЕДЕНИЕ '. .. 5

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ГЛАВА I. СОВРЕМЕННЫЕ ДОСТИЖЕНИЯ В ИЗУЧЕНИИ ПАТОГЕНЕЗА,

ПАТОГЕНЕТИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ И ТЕРАПИИ ИММУННЫХ

НЕВРИТОВ 12

I.I. Достижения в изучении морфологических изменений

в почках при гломерулонефрите 12

1.2.-Иммунологические аспекты патогенеза нефрита. . . 15 1.3. Коагулологические аспекты патогенеза нефрита . . 22

  1. Генерализованные расстройства тромбин-плаз-миновой системы. 26

  2. Сдвиги в тромбин-плазминовой системе при иммунных заболеваниях почек 29

  3. Патогенетическая профилактика и терапия иммунного нефрита 34

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДО ИССЛЕДОВАНИЯ 39

  1. материал 39

  2. Методы воспроизведения нефрита 40

  1. Воспроизведение нефротоксического нефрита. . . 40

  2. Воспроизведение аутоиммунного адьювантного нефрита 42

2.3. Методики исследований 42

  1. Исследование состояния гуморального иммунитета 42

  2. Исследование состояния тромбин-плазминовой

системы 43

  1. Исследование парциальных функций почек .... 44

  2. Морфологические методы исследования 45

ГЛАВА 3. НЕФРОТОКСИЧЕСКИЙ НЕФРИТ МАЗУІИ (I серия опытов). . 49

3.1. Нефротоксический нефрит у кроликов 49

  1. Характеристика гуморального иммунитета при нефротоксическом нефрите у кроликов. ..... 49

  2. Состояние тромбин-плазминовой системы при нефротоксическом нефрите у кроликов 50

  3. Функциональное состояние почек при нефротоксическом нефрите у кроликов 55

  4. Морфологические изменения в почках при нефротоксическом нефрите у кроликов ....... 57

3.2. Нефротоксический нефрит у крыс 73

ГЛАВА 4. ВЛИЯНИЕ ПРВДВАРИТЕЛШОГО ВВЩЕНИЯ ГЕПАРИНА НА

ТЕЧЕНИЕ НЕФРОТОКСИЧЕСКОП) НЕФРИТА МАЗУІИ

(II серия опытов) 101

4.1. Течение нефротоксического нефрита у кроликов в
условиях профилактического введения гепарина . . 101

  1. Состояние гуморального иммунитета. ...... 101

  2. Состояние тромбин-плазминовой системы 103

  3. Характеристика функционального состояния

почек 106

4.1.4. Морфологические исследования почек кроликов
при нефротоксическом нефрите в условиях
профилактического введения гепарина 109

4.2. Нефротоксический нефрит у крыс в условиях
профилактического введения гепарина ИЗ

ГЛАВА 5. ТЕЧЕНИЕ НЕФРОТОКСИЧЕСКОГО НЕФРИТА МАЗУІИ В

УСЛОВИЯХ ВВВДЕНИЯ ГЕПАРИНА С ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ ЦЕЛЬЮ
(III серия опытов) .118

5.1. Влияние гепарина на течение нефротоксического
нефрита у кроликов 118

  1. Состояние гуморального иммунитета при нефро-токсическом нефрите у кроликов в условиях применения с терапевтической целью гепарина . .119

  2. Состояние тромбин-плазминовой системы при не-фротоксическом нефрите у кроликов в условиях применения с терапевтической целью гепарина . .122

  3. Характеристика функционального состояния почек при нефротоксическом нефрите у кроликов в условиях применения гепарина с терапевтической целью 125

  4. Морфологические изменения почек при нефротоксическом нефрите у кроликов в условиях применения гепарина с терапевтической целью 128

5.2. Морфологические изменения в почках крыс при
нефротоксическом нефрите в условиях применения
гепарина с терапевтической целью .133

ГЛАВА 6. АУТОИММУННЫЙ АДЬЮВАНТНЫИ НЕФРИТ .141

  1. Аутоиммунный адьювантныи нефрит у крыс 141

  2. Аутоиммунный адьювантныи нефрит у крыс в условиях предварительного введения гепарина 154

  3. Аутоиммунный адьювантныи нефрит у крыс в условиях применения гепарина с терапевтической целью. .156

ЗАКЛЮЧЕНИЕ 163

ВЫВОДЫ 188

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 191

Введение к работе:

Актуальность темы. Выяснение патогенеза и разработка на этой основе эффективных методов профилактики и терапии нефрита остается одной из нерешенных и весьма актуальных проблем современной клинической и экспериментальной медицины.

Значительные успехи, достигнутые в решении этой проблемы, стали возможными благодаря современным достижениям молекулярной биологии и прежде всего таких ее разделов, как иммунология и биохимия.

В настоящее время считается, что большинство форм гломеру-лонефрита вызывается или опосредуется иммунным механизмом.

Первые убедительные доказательства иммунологически индуцированного повреждения почки получены в результате эксперименталь-ных исследований В.К.Линдемана (1900) и M.Masugi (1933) и подтверждены в последующем многими авторами. На экспериментальных моделях широко исследуются два иммунологических механизма, достоверно воспроизводящих основные проявления заболеваний почек у человека: первый механизм - реакция антител с почечными антигенами (нефротоксический нефрит) и второй - комплексы антиген-антитело, образующиеся в системе кровообращения, а затем осаждающиеся на почечных структурах (аутоиммунный нефрит).

Хотя иммунная природа нефротоксического и аутоиммунного нефрита не вызывает сомнений, многие из возникающих в почках морфологических изменений и прежде всего массивных отложений фибрина, невозможно объяснить с позиций только иммунной теории.

Установление явления отложения фибрина в почках побудило многих исследователей к изучению роли коагуляционной системы в

патогенезе иммунных нефритов. В результате было установлено, что острый нефрит закономерно сопровождается гаперкоагулядией с одновременным угнетением фибринолиза (М.П.Матвеев и соавт., 1978; Г.В.Андреенко и соавт., 1979, 1982; В.А.Варшавский и соавт.,1980; З.Т.Самойлова, В.М.Панченко, 1980; Г.П.Щульцев и соавт., 1981; Н.В.Сократов, 1983; A.Okninska и соавт., 1978; L.Giroux et al., 1979). При этом можна полагать, что в почках эта гиперкоагуляция носит декомпенсированный характер. Об этом свидетельствует обнаружение многими исследователями отложении фибрина в капиллярах клубочков, вдоль базальних мембран, в просветах гломерулярных капилляров (Г.А.Белицкая и соавт., 1975; И.Н.Потапова и соавт., 1975; В.И.Наумова и соавт., 1977; p.Vassaii et al., 1963, 1964; P.Kinsaid-Smith, 1972) и фибрин-положительных веществ внутри клеток (І.И.Амбарова, 1978). Доказана также возможность предотвращения развития экспериментального нефрита профилактическим введением гепарина. Получен хороший терапевтический эффект от применения гепарина и фибринолитических препаратов в эксперименте и клинике (Б.Гальперин и соавт., 1966; В.П.Балупа, 1977; В.А.Монастырский и соавт., 1978, 1979, 1980, 1982; Л.И.Амбарова, 1978; Н.А.Мухин и соавт., 1983).

Исследования последних лет позволили обосновать иммуно-коа-гуляционную теорию патогенеза нефрита (В. А.Монастырский, Л.И.Ам-барова, 1978). Согласно этой теории повреждение почек при иммунном нефрите обусловлено не только иммунным процессом, но и генерализованным декомпенсированным тромбиногенезом (гиперкоагуляцией) в различных средах почек.

В то же время ряд частных вопросов коагуляционного звена патогенеза нефрита остаются невыясненными. В частности, совершенно неизучены ультраструктурные и молекулярные механизмы пато-

генетического действия декомпенсированного тромбиногенеза при этой патологии. Неизученным оставался также механизм саногенного действия гепарина.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования явилось выяснение при экспериментальном нефрите ультраструктурных и молекулярных механизмов патогенетического действия декомпенсированного тромбиногенеза (тромбина) и особенно саногенного действия гепарина.

Для достижения этой цели в работе поставлены следующие задачи:

  1. Воспроизвести в эксперименте нефротоксический и аутоиммунный адьювантный нефриты и изучить на этих моделях в динамике сдвиги в иммунной и тромбин-плазминовои системах, функциональное состояние почек и морфологические изменения почек по данным све-тооптической и электронной микроскопии.

  2. Изучить влияние профилактического введения гепарина на динамику изучаемых показателей при экспериментальных нефритах.

  3. Изучить влияние гепарина, примененного с терапевтической целью на течение экспериментального нефрита в используемых моделях.

Материал и методы исследования. Опыты поставлены на кроликах и белых крысах, у которых воспроизводили нефротоксический и аутоиммунный адьювантный нефриты. На 15 кроликах и 79 крысах с нефротоксический нефритом поставлено 3 серии опытов: в первой воспроизводили нефрит, во второй - перед каждой инъекцией нефро-токсической сыворотки и на протяжении 5 дней вводили гепарин в дозе 3 мг/кг, в третьей серии - на 15-й день после последней инъекции сыворотки вводили гепарин в течение 10 дней.

На 88 крысах с аутоиммунным адьювантным нефритом поставлены

аналогичные три серии опытов.

У кроликов всех трех серий опытов изучали в динамике состояние гуморального иммунитета, тромбин-плазминовой системы, парциальные функции почек. Яо окончании опыта животных умерщвляли, а почки забирали для гистологического и электронномикроскопического исследования.

У крыс с нефротоксическим и аутоиммунным нефритом изучали в динамике только структуру почек с помощью гистологических и элек-тронномикроскопических методов исследования.

Научная новизна работы. В работе впервые предпринята попытка выяснить механизмы саногенного действия гепарина при нефроток-сическом нефрите. Установлено, что гепарин, с одной стороны,угнетая иммунные и аутоиммунные процессы, прерывает иммунное звено в механизме повреждений почек, а с другой стороны, ингибируя тром-бинообразование, ликвидирует второе - коагуляционное - звено патогенеза нефрита.

Установлено также, что важным промежуточным звеном в сано-генном действии гепарина является активация плазминогенеза, поскольку под влиянием образовавшегося плазмина резко усиливаются процессы внутриклеточной и клеточной репаративной регенерации.

Практическая ценность. Полученные результаты о важной роли декомпенсированного тромбиногенеза (гиперкоагуляции) в патогенезе нефрита и особенно раскрытие механизмов саногенного действия гепарина позволяют обосновать большую целесообразность применения гепарина в терапии гломерулонефритов.

Результаты исследований. Проведенными исследованиями установлено, что введение нефротоксической снворотіш кроликам вызывало у них нефрит с характерными функционально-морфологическими проявлениями. У нелеченных животных развивалась гиперкоагуляция

с одновременным угнетением фибринолиза, снижалась фильтрационно-реабсорбционная функция почек, наблвдалось значительное повреждение структуры почек. Серологическими исследованиями установлено, что уже на 8-2 день после введения нефротоксической сыворотки у большинства, а на 15-й день у всех животных первой стадии опытов выявлены антитела против гетерологического белка введенной сыворотки. В последующие дни содержание этих антител значительно снижалось и на 35-й день эксперимента они выявлены в низких титрах у 3 из 5 кроликов. Наряду с этим, начиная с 15-го дня опыта, у многих животных обнаруживались антипочечные аутоантитела, количество которых возрастало с развитием патологического процесса.

При гистологическом исследовании почек кроликов обнаружены картины интракапиллярного пролиферативного гломерулонефрита, характеризующиеся выраженной пролиферацией клеток, утолщением базальних мембран, наличием фибрин-положительных веществ в просветах капсул и капилляров клубочков, а также внутри эндотелиалъных и эпителиальных клеток.

При электронномикроскопическом исследовании почек крыс и кроликов наблюдались характерные для нефрита нарушения ультраструктурной организации различных отделов нефрона: утолщение ба-зальных мембран капилляров клубочков за счет отложения на них иммунных комплексов и фибрина, усиление процесса пролиферации крупных эндотелиалъных и мезангиальных клеток, деструктивные изменения органелл. При изучении локализации (Na+ + к+)-АТФазы в эпителиальных клетках проксшлальных частей канальцев почек кроликов установлено значительное снижение активности этого фермента,особенно в участках дистрофии.

Гепарин, введенный с профилактической целью, предупреждал возникновение всех проявлений как нефротоксического, так и ауто-

иммунного нефрита.

После терапии гепарином прекращалось дальнейшее развитие патологического процесса. У кроликов заметно снижалось образование как антител против гетерологического белка нефротоксической сыворотки, так и антипочечных аутоантител, полностью ингибировался тромбиногенез (гиперкоагуляция) и одновременно усиливался фибри-нолиз с последующей полной нормализацией функционального состояния тромбин-плазминовой системы, повышались парциальные функции почек вплоть до полной нормализации.

Морфологическими исследованиями установлено, что введение гепарина вело к постепенному исчезновению отложений фибрина и фи-бринположительных веществ в различных средах почек, прекращению процесса пролиферации и резкому усилению внутриклеточных и клеточных репаративных регенеративных процессов, что вело к постепенному восстановлению структуры почек.

Положения, выносимые на защиту:

  1. комплексы антиген-анитело, образующиеся при иммунных и аутошшунных процессах, закономерно обуславливают усиление тромбиногенеза (пшеркоагуляции) во всех средах почек, что играет решающую роль в дальнейшем повреждении их структуры и функций;

  2. механизм саногенного действия гепарина сложный и имеет несколько направлений: во-первых, он угнетает вплоть до полного прекращения иммунные и аутоиммунные процессы, благодаря чему, с одной стороны, прерывает иммунное звено повреждений почек, а с другой - предотвращает активацию тромбиногенеза; во-вторых, будучи ингибитором тромбиногенеза и действия тромбина, блокирует ко-агуляционное звено патогенеза данного процесса; в-третьих, активируя плазминогенез, обуславливает усиление внутриклеточных и клеточных репаративных и регенеративных процессов;

- II -

3) в патогенезе и саногенезе нефротоксического и аутоиммунного нефрита четко выявляются прямые и обратные связи между иммунной и тромбин-плазминовои системами.

Подобные работы
Винокуров Максим Григорьевич
Исследование механизмов действия липополисахарида Rhodobacter capsulatus на функциональные ответы и апоптоз фагоцитов крови человека при активации эндотоксинами
Федосова Наталия Федоровна
Механизмы регуляционного действия дигидрокверцетина (диквертина) на функциональную активность и метаболизм полиморфноядерных нейтрофилов у больных сахарным диабетом 2 типа
Вуколова Марина Николаевна
Исследование механизмов нейропротекторного действия пролинсодержащих дипептидов : На модели экспериментального паркинсонического синдрома
Брциева Зарина Станиславовна
Патофизиологические механизмы протекторного действия антиоксидантов в лечении и профилактике хронической почечной патологии
Слесарева Наталья Валерьевна
Психофизиологические механизмы устойчивости к действию техногенных физических факторов [Электронный ресурс]
Коболев Евгений Владимирович
Патофизиологические механизмы повышенной возбудимости головного мозга в условиях транскраниального действия импульсного магнитного поля (экспериментальное исследование)
Шапкин Юрий Григорьевич
Исследование механизмов ишемической деполяризации при локальном компрессионном повреждении коры головного мозга на фоне действия нейротропных препаратов [Электронный ресурс]
Бондаренко Наталья Леонидовна
Исследование клинической эффективности и механизмов действия имунофана при хронических обструктивных заболеваниях легких [Электронный ресурс]
Лысенко Татьяна Михайловна
Антидепрессивная активность и аспекты механизма действия новых производных аминоурацила
Манфановская Виктория Владимировна
Особенности фармакотерапевтических эффектов в механизме действия иммунотропных и нейротропных препаратов при формировании темпокомпрессионного отека-набухания головного мозга

© Научная электронная библиотека «Веда», 2003-2013.
info@lib.ua-ru.net