Электронная библиотека Веда
Цели библиотеки
Скачать бесплатно
Доставка литературы
Доставка диссертаций
Размещение литературы
Контактные данные
Я ищу:
Библиотечный каталог российских и украинских диссертаций

Вы находитесь:
Диссертационные работы России
Биологические науки
Физиология

Диссертационная работа:

Горюнова Татьяна Ефимовна. Гиалуронат гидролиза почки млекопитающих и их роль в механизме действия антидиуретического гормона : ил РГБ ОД 61:85-3/1047

смотреть содержание
смотреть введение
Содержание к работе:

стр.
ВВЕДЕНИЕ 4

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. МЕХАНИЗМ ДЕЙСТВИЯ ВАЗОПРЕССИНА
НА ВОДНУЮ ПРОНИЦАЕМОСТЬ ОСМОРЕГУЛИЕТЩЕГО ЭПИ
ТЕЛИЯ 9

  1. Взаимодействие вазопрессина с рецептором и синтез ц-АШ 10

  2. Вазопрессин-стимулируемый синтез простаглацди-нов и их участие в развитии антидиуретической реакции 13

  3. ц-АШ-зависимые протеин киназы, участвующие в изменении водной проницаемости осморегулирующе-

го эпителия 19

  1. Вазопрессин-зависимое изменение цитоскелета клеток осморегулирующего эпителия 21

  2. Агрегированные частицы. 23

  3. Вазопрессин-зависимый экзоцитоз и эндоцитоз в мочевом пузыре жабы 31

  4. АДГ-зависимое изменение внеклеточных гликоз -аминогликанов 34

  5. Механизм водной проницаемости осморегулирующего эпителия 41

Глава П. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 53

  1. Препараты, используемые в работе 53

  2. Методаческие приемы при исследовании действия АДГ (питуитрина П) и ц-АШ на активность гиал-уронат гидролаз в экспериментах in vivo 54

2.3. Методические приемы при исследовании действия
АДГ (питуитрина П) и ц-АШ на активность и ло
кализацию гиалуронат гидролаз в экспериментах

in vitro 56

2.4. Аналитические методы 64

Глава Ш. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 79

  1. Влияние АДГ на активность гиалуронат гидролаз ткани почек крыс и кроликов 79

  2. Действие АДГ и ц-А на активность гиалуронат гидролаз клеток сосочка почки 91

  3. Влияние АДГ на локализацию гиалуронат гидролаз клеток сосочка почки 109

  4. Влияние катионов и мочевины на активность гиалуронат гидролаз 122

Глава Л, ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ 134

ВЫВОДЫ 157

СПИСОК ОСНОВНОЙ ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 160

Введение к работе:

Актуальность темы. Водно-солевой гомеостаз у млекопитающих поддерживается системой рефлекторных реакций, в резуль -тате которых основной эффектор - почка - обеспечивает задержку в организме или выведение необходимых количеств электролитов ж вода. Ведущая роль в регуляции водовыделительной функ -ции почек принадлежит гормону нейрогипофиза вазопрессину (или антидиуретическому гормону - АДГ), под влиянием которого происходит резкое увеличение водной проницаемости эпителия собирательных трубок.

В настоящее время существуют две точки зрения на меха -низм изменения гидравлической проницаемости эпителия собирательных трубок при действии гормональных стимулов, удовлетворительно объясняющие накопленные экспериментальные данные. Согласно первой, основным скорость-лимитирующим барьером эпителия является апикальная плазматическая мембрана формирующих его клеток. Предполагается, что движение воды через этот ба -рьер осуществляется через малые поры, обеспечивающие строгую молекулярную селективность. При действии гормона происходит значительное увеличение числа пор в апикальной мембране без изменения диаметра, а значит и способности пропускать молекулы большие, ЧЄМ МОЛекуЛЫ ВОДЫ (Handler, Qrloff, 1981; Dousa, 1981; De Sousa, Grosso, 1981; Hebert, Andreoli, 1982a).

Вторая гипотеза, впервые сформулированная А.Г. Гинецин -ским (1958, 1964), предполагает, что основным барьером, определяющим скорость осмотического тока воды через эпителий со -бирательных трубок, являются внеклеточные структуры, сформи -

рованные преимущественно гликозаминогликанами. Гормон-зависи-мое увеличение проницаемости обеспечивается в результате ферментативного разрушения полисахаридов барьерного слоя. Экспе-риментальное доказательство гипотезы базируется на системе данных, среди которых наиболее существенными являются следующие: при действии гормона происходит деструкция внеклеточных гликозаминогликанов (Гинецинский и др., 1958; Закс, Титова, 1959; Крестинская, 1964; Могard, 1967; Иванова, 1972); при антидиурезе в моче резко увеличивается активность тканевой гиалуроницазы - эцдогидролазы, способной расщеплять гиалуро -новую кислоту, основной компонент гликозаминогликанов почки (Гинецинский и др., 1954; Иванова, 1958а; Наточин, 1959; Thorn

et al., 1962; Rosenfeld et al., 1963); введение антител против гиалуронидазы блокирует развитие антидиуретической реак -ции, вызываемой гормоном (Law, Rowen, 1981); экзогенная ги -алуронидаза, введенная внутривенно или непосредственно в со -бирателыше трубки, вызывает развитие антидиуретической реакции (Гинецинский, Васильева, 1963; Иванова, Перехвальская, 1968).

Таким образом, есть все основания предполагать, что скорость реабсорбции воды определяется состоянием структур, примыкающих к собирательным трубкам и отделяющих их от других элементов концентрирующей системы, и поэтому представляется существенным дальнейшее изучение механизма регуляции внекле -точных протеогликанов. Очевидно, что более детальное молеку -лярное описание механизмов, лежащих в основе действия АДГ, требует изучения процессов обмена полисахаридов и в первую очередь ферментов, вовлеченных в этот обмен.

Целью настоящего исследования явилось изучение действия АДГ на уровень активности и тканевую локализацию ферментов катаболизма гиалуроновой кислоты.

Задачи исследования. Основные задачи данной работы заключались в следующем:

  1. Исследовать уровень суммарной активности гиалуронат гидролаз в функционально различных зонах почки млекопитающих и состав ферментов, участвующих в катаболизме гиалуроновой кислоты.

  2. Изучить действие АДГ иед4АМФ на суммарную активность ферментов, гидролизующих гиалуроновую кислоту, и на актив -ность отдельных гиалуронат гидролаз.

  3. Исследовать внутри- и внеклеточное распределение гиалуронат гидролаз в суспензии интактных клеток сосочка почки и клеток, обработанных АДГ.

  4. Проанализировать влияние некоторых компонентов вне -клеточной среда сосочка почки (ионов натрия, калия, кальция, магния и мочевины) на активность изучаемых ферментов.

Научная новизна. Впервые обнаружено, что максимальная активность гиалуронат гидролаз почки млекопитающих выявляется в зоне сосочка. Установлено, что АДГ стимулирует увеличение суммарной активности гиалуронат гидролаз как в ткани, так и в суспензии клеток сосочка почки. Этот эффект обусловлен главным образом повышением активности ^-глюкуронидазы. Действие гормона на активность ферментов почки, так же как и его действие на водную проницаемость осморегулирующего эпи -телия, опосредуется увеличением синтеза ц-АМФ, поскольку показано, что ц-АМФ оказывает действие на активность ферментов

катаболизма гиалуроновой кислоты в почке подобное действию АДГ. Впервые усановлено, что АДГ индуцирует секрецию экзо -гидролаз из клеток сосочка почки, тогда как гиалуроницаза, как в присутствии, так и в отсутствие гормона, практически полностью локализована на внешней поверхности мембраны клеток почки. В экспериментах in vitro было продемонстрировано, что концентрации ионов и мочевины в интеротициальнои среде в широком диапазоне физиологических состоянии почки допускают протекание ферментативных реакций, необходимых для исчерпы -вающего гидролиза гиалуроновой кислоты. Изменение степени гидратации животного, определяющей состав интеротициальнои жидкости сосочка почки, может выступать как дополнительный фактор, регулирующий активность внеклеточной гиалуроницазы.

На основании полученных данных предложена схема последовательности молекулярных этапов развития антидиуретичес -кой реакции.

Теоретическая и практическая значимость. Настоящее экспериментальное исследование развивает современное пред -ставление о молекулярных механизмах действия вазопрессина на водную проницаемость осморегулирующего эпителия. Данные о вовлеченности ферментов катаболизма гиалуроновой кислоты в осморегулиругощую функцию почки могут быть основой для разработки направленного воздействия на скорость реабсорбции вода в почке. Полученные результаты используются при чтении курса лекций по физиологии в НГУ и НГМИ.

Апробация работы. Результаты исследований были доложены на ІУ Всесоюзной конференции по физиологии почек и водно-солевому обмену (Черновцы, 1974), на II Европейском коллок -

виуме по физиологии почки (Балатонфюред, Венгрия, 1977), на У Всесоюзной конференции по физиологии почек и водно-солевому обмену (Ленинград, 1978), на 28 Международном конгрессе физиологических наук (Будапешт, Венгрия, 1980), на УІ Всесоюзной конференции по физиологии почек и водно-солевому обмену (Новосибирск, 1981), на ІУ Европейском коллоквиуме по физиологии почки (Прага, ЧССР, 1982).

Объём работы. Материалы .диссертации изложены на 183 страницах машинописного текста, включая 23 рисунка и 14 таблиц. Список основной использованной литературы составляет 206 источников, в том числе 162 иностранных.

, - 9 -

Подобные работы
Долотов Олег Валентинович
Механизмы действия пептида Семакс на центральную нервную систему: роль нейротрофинов
Амстиславская Тамара Геннадьевна
Анализ поведенческих и нейроэндокринных механизмов половой активации самцов: роль неблагоприятных воздействий в разные периоды онтогенеза и серотонина мозга
Кузьмина Галина Ивановна
Роль вестибулярной сигнализации в механизме регулирования холодового тремора
Аношкина Ирина Анатольевна
Роль моноаминергических систем мозга в механизмах регуляции поведения сусликов (Citellus undulatus)
Персиянцева Надежда Александровна
Роль протеин киназы С в механизмах нарушения кальциевого гомеостаза в нейронах мозжечка и коры при гиперстимуляции глутаматных рецепторов
Ханагян Татьяна Александровна
Роль гормонов щитовидной железы в механизме поддержания натриевого гомеостаза у нормотензивных крыс линии вистар и гипертензивных крыс линий OXYS и НИСАГ
Казанский Виктор Евгеньевич
Роль цитоскелета сердечных фибробластов в механизме генерации механоиндуцированных потенциалов
Щербина Дмитрий Николаевич
Исследование нейрофизиологических механизмов оценки перцептивного времени и их роли в сенсомоторной интеграции
Кушакова Анна Владимировна
Роль функционального состояния центральной нервной системы в механизмах аутохронометрии человека
Исмаилова Асия Ильгизовна
Роль оксида азота и ионов кальция в механизмах долговременной сенситизации у виноградной улитки

© Научная электронная библиотека «Веда», 2003-2013.
info@lib.ua-ru.net